分子生物學(xué)組實(shí)習(xí)報告

重慶醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院

實(shí)習(xí)科室：重醫(yī)附一院檢驗(yàn)科分子生物學(xué)室實(shí)習(xí)時間：專業(yè)：年級：學(xué)號：姓名：

實(shí)習(xí)報告

201*.8.29～201*.9.25醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)本科201*級201*221349潘俊希分子生物學(xué)室實(shí)習(xí)報告

前言

分子診斷學(xué)作為一門新興的學(xué)科，在疾病的診斷、療效監(jiān)測等多方面都逐漸扮演起了重要的角色，但真正能很好的將分子生物學(xué)診斷信息運(yùn)用好的醫(yī)務(wù)工作者還只是少數(shù)，不少醫(yī)生目前仍對傳統(tǒng)的檢驗(yàn)項(xiàng)目的臨床意義和可信度仍然懷有質(zhì)疑的態(tài)度，更不用說一些剛發(fā)展起來的檢驗(yàn)項(xiàng)目。因此檢驗(yàn)專業(yè)的實(shí)習(xí)生不僅要掌握分子診斷學(xué)常用檢驗(yàn)項(xiàng)目的原理、方法，更應(yīng)該孰知其臨床意義，更好的與臨床進(jìn)行溝通，才能更好的運(yùn)用先進(jìn)的檢驗(yàn)診斷技術(shù)為患者服務(wù)。一、實(shí)習(xí)時間：

201*.8.29～201*.9.25

二、實(shí)習(xí)科室

附一院檢驗(yàn)科分子生物學(xué)室

三、實(shí)習(xí)目的：

熟悉分子室常規(guī)的檢查項(xiàng)目，掌握標(biāo)本的簽收和處理，掌握PCR的原理，核酸（DNA和RNA）的提取，PCR儀的使用，熟悉核酸雜交的原理和操作方法及雜交儀的使用。了解各檢測項(xiàng)目的臨床意義。

四、實(shí)習(xí)內(nèi)容：

1．HBVDNA檢測（定性和定量）、HCVRNA檢測（定量）：核酸提取是擴(kuò)增前最主要的步驟，每個環(huán)節(jié)都要注意防止交叉污染。主要步驟：每個EP管加100微升DNA濃縮液，再加100微升待測血清，震蕩混勻，離心1201*rpmx10min，用加樣槍棄上清，加30微升DNA提取液，震蕩，金屬浴（100℃）10min，離心1201*rpmx5min。提取后，配試劑，加樣，擴(kuò)增1h45min，擴(kuò)增儀型號為7300。分析結(jié)果。注意，金屬浴過程中，金屬浴箱要蓋上，每個EP管要蓋嚴(yán)，防止加熱過程中發(fā)生爆管，造成實(shí)驗(yàn)室的污染。若發(fā)生爆管，詳細(xì)記錄好發(fā)生爆管的標(biāo)本編號，爆管發(fā)生的原因，時間等情況。HSV-II型病毒DNA檢測（定量）、HPV病毒（6、11型和16、18型）DNA檢測（定量）的標(biāo)本均為分泌物，標(biāo)本加生理鹽水，震蕩，取1ml至EP管，離心1201*rpmx5min，棄上清，注意沉淀易漂起，不要講沉淀?xiàng)壍�，�?0微升DNA提取液，震蕩，金屬�。�100℃）10min。然后配試劑，加樣，擴(kuò)增1h20min，PCR儀為7600。檢驗(yàn)結(jié)果需要與患者的病史、臨床信息綜合分析，絕對不可僅僅只憑PCR結(jié)果進(jìn)行疾病的診斷。

2．核酸雜交主要是指HPV21型檢測，標(biāo)本多為女性的陰道分泌物，首先提取DNA，進(jìn)行核酸體外擴(kuò)增，得到擴(kuò)增產(chǎn)物，然后金屬浴煮沸，淬火，得到大量單鏈的DNA片段，將單鏈DNA片段加入到500微升雜交液中（之前的DNA提取及淬火等操作在標(biāo)本處理間進(jìn)行，擴(kuò)增在核酸擴(kuò)增間進(jìn)行），并到產(chǎn)物分析間進(jìn)行核酸的雜交，每臺雜交儀可一次做15個標(biāo)本，應(yīng)注意防止漏液和交叉污染。

3．其他流式細(xì)胞術(shù)等，但由于標(biāo)本量較少，平時多的不多。

五、實(shí)習(xí)存在的問題和不足

分子生物學(xué)室的實(shí)習(xí)感覺還是太過短暫，再加之實(shí)習(xí)人數(shù)多，操作的機(jī)會少，特別是標(biāo)本少的項(xiàng)目，基本還是處于見習(xí)的狀態(tài)，而且相比其他組的實(shí)習(xí)，缺乏主動思考的的動力，也許事理論知識學(xué)習(xí)不夠扎實(shí)，也許是跟老師交流太少，在以后的學(xué)習(xí)和工作中，應(yīng)加強(qiáng)相關(guān)學(xué)習(xí)，真正掌握好這這一門新興的學(xué)科，為今后的學(xué)習(xí)、該工作或者科研服務(wù)

六、實(shí)習(xí)感想：

一個月的實(shí)習(xí)很快結(jié)束了，每天其實(shí)都在做著大量的重復(fù)工作，但是我并沒有因此而感到厭煩，相反我覺得這是一門藝術(shù)，因?yàn)闆]有誰能保證2次加樣的量是完全一樣的，而我們能做的就是是通過不斷的練習(xí)，規(guī)范我們的操作，使每次加樣量盡可能的減小誤差，會做不代表能做好，真正的快樂就在于，將別人認(rèn)為枯燥無聊的工作做的完美無瑕。

分子診斷學(xué)是一門有力的科研武器，不僅可以運(yùn)用于臨床診斷，在今后的工作中我們也可以運(yùn)用這一門學(xué)科，在學(xué)術(shù)上進(jìn)行更深入的探索

在實(shí)習(xí)結(jié)束之際，我要感謝分子生物學(xué)室每一位老師，感謝他們耐心、親切的教導(dǎo)，是他們嚴(yán)謹(jǐn)、一絲不茍的工作態(tài)度教育了我，是他們團(tuán)結(jié)協(xié)作、融洽的工作氣氛感染了我。他們循循善誘給我講解，他們耐心規(guī)范了我的操作，他們給予我很大的信任與鼓勵，。而我能做的是在今后的學(xué)習(xí)和工作中帶著一顆感恩的心認(rèn)真負(fù)責(zé)地工作，培養(yǎng)高尚的職業(yè)道德、嚴(yán)肅的科學(xué)態(tài)度和一絲不茍的工作作風(fēng)，使自己成為一名合格的檢驗(yàn)專業(yè)的的優(yōu)秀人員。

祝福分子生物學(xué)室每一位老師工作順利、闔家幸福

07級醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)本科潘俊希

201*-10-05

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分子生物學(xué)室實(shí)習(xí)報告

前言

分子診斷學(xué)作為一門新興的學(xué)科，在疾病的診斷、療效監(jiān)測等多方面都逐漸扮演起了重要的角色，但真正能很好的將分子生物學(xué)診斷信息運(yùn)用好的醫(yī)務(wù)工作者還只是少數(shù)，不少醫(yī)生目前仍對傳統(tǒng)的檢驗(yàn)項(xiàng)目的臨床意義和可信度仍然懷有質(zhì)疑的態(tài)度，更不用說一些剛發(fā)展起來的檢驗(yàn)項(xiàng)目。因此檢驗(yàn)專業(yè)的實(shí)習(xí)生不僅要掌握分子診斷學(xué)常用檢驗(yàn)項(xiàng)目的原理、方法，更應(yīng)該孰知其臨床意義，更好的與臨床進(jìn)行溝通，才能更好的運(yùn)用先進(jìn)的檢驗(yàn)診斷技術(shù)為患者服務(wù)。實(shí)習(xí)目的：

熟悉分子室常規(guī)的檢查項(xiàng)目，掌握標(biāo)本的簽收和處理，掌握PCR的原理，核酸（DNA和RNA）的提取，PCR儀的使用，熟悉核酸雜交的原理和操作方法及雜交儀的使用。了解各檢測項(xiàng)目的臨床意義。

實(shí)習(xí)內(nèi)容：

1．HBVDNA檢測（定性和定量）、HCVRNA檢測（定量）：核酸提取是擴(kuò)增前最主要的步驟，每個環(huán)節(jié)都要注意防止交叉污染。主要步驟：每個EP管加100微升DNA濃縮液，再加100微升待測血清，震蕩混勻，離心1201*rpmx10min，用加樣槍棄上清，加30微升DNA提取液，震蕩，金屬浴（100℃）10min，離心1201*rpmx5min。提取后，配試劑，加樣，擴(kuò)增1h45min，擴(kuò)增儀型號為7300。分析結(jié)果。注意，金屬浴過程中，金屬浴箱要蓋上，每個EP管要蓋嚴(yán)，防止加熱過程中發(fā)生爆管，造成實(shí)驗(yàn)室的污染。若發(fā)生爆管，詳細(xì)記錄好發(fā)生爆管的標(biāo)本編號，爆管發(fā)生的原因，時間等情況。HSV-II型病毒DNA檢測（定量）、HPV病毒（6、11型和16、18型）DNA檢測（定量）的標(biāo)本均為分泌物，標(biāo)本加生理鹽水，震蕩，取1ml至EP管，離心1201*rpmx5min，棄上清，注意沉淀易漂起，不要講沉淀?xiàng)壍�，�?0微升DNA提取液，震蕩，金屬�。�100℃）10min。然后配試劑，加樣，擴(kuò)增1h20min，PCR儀為7600。檢驗(yàn)結(jié)果需要與患者的病史、臨床信息綜合分析，絕對不可僅僅只憑PCR結(jié)果進(jìn)行疾病的診斷。2．核酸雜交主要是指HPV21型檢測，標(biāo)本多為女性的陰道分泌物，首先提取DNA，進(jìn)行核酸體外擴(kuò)增，得到擴(kuò)增產(chǎn)物，然后金屬浴煮沸，淬火，得到大量單鏈的DNA片段，將單鏈DNA片段加入到500微升雜交液中（之前的DNA提取及淬火等操作在標(biāo)本處理間進(jìn)行，擴(kuò)增在核酸擴(kuò)增間進(jìn)行），并到產(chǎn)物分析間進(jìn)行核酸的雜交，每臺雜交儀可一次做15個標(biāo)本，應(yīng)注意防止漏液和交叉污染。

3．其他流式細(xì)胞術(shù)等，但由于標(biāo)本量較少，平時多的不多。

實(shí)習(xí)存在的問題和不足

分子生物學(xué)室的實(shí)習(xí)感覺還是太過短暫，再加之實(shí)習(xí)人數(shù)多，操作的機(jī)會少，特別是標(biāo)本少的項(xiàng)目，基本還是處于見習(xí)的狀態(tài)，而且相比其他組的實(shí)習(xí)，缺乏主動思考的的動力，也許事理論知識學(xué)習(xí)不夠扎實(shí)，也許是跟老師交流太少，在以后的學(xué)習(xí)和工作中，應(yīng)加強(qiáng)相關(guān)學(xué)習(xí)，真正掌握好這這一門新興的學(xué)科，為今后的學(xué)習(xí)、該工作或者科研服務(wù)

實(shí)習(xí)感想：

一個月的實(shí)習(xí)很快結(jié)束了，每天其實(shí)都在做著大量的重復(fù)工作，但是我并沒有因此而感到厭煩，相反我覺得這是一門藝術(shù)，因?yàn)闆]有誰能保證2次加樣的量是完全一樣的，而我們能做的就是是通過不斷的練習(xí)，規(guī)范我們的操作，使每次加樣量盡可能的減小誤差，會做不代表能做好，真正的快樂就在于，將別人認(rèn)為枯燥無聊的工作做的完美無瑕。

分子診斷學(xué)是一門有力的科研武器，不僅可以運(yùn)用于臨床診斷，在今后的工作中我們也可以運(yùn)用這一門學(xué)科，在學(xué)術(shù)上進(jìn)行更深入的探索

在實(shí)習(xí)結(jié)束之際，我要感謝分子生物學(xué)室每一位老師，感謝他們耐心、親切的教導(dǎo)，是他們嚴(yán)謹(jǐn)、一絲不茍的工作態(tài)度教育了我，是他們團(tuán)結(jié)協(xié)作、融洽的工作氣氛感染了我。他們循循善誘給我講解，他們耐心規(guī)范了我的操作，他們給予我很大的信任與鼓勵，。而我能做的是在今后的學(xué)習(xí)和工作中帶著一顆感恩的心認(rèn)真負(fù)責(zé)地工作，培養(yǎng)高尚的職業(yè)道德、嚴(yán)肅的科學(xué)態(tài)度和一絲不茍的工作作風(fēng)，使自己成為一名合格的檢驗(yàn)專業(yè)的的優(yōu)秀人員。祝福分子生物學(xué)室每一位老師工作順利、闔家幸福

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