實驗動物總結(jié)(201*壓縮版)
實驗動物總結(jié)(小月壓縮版)(201*級碩士隊)
實驗動物考前總結(jié)(201*-11-20)
1.實驗動物(Laboratoryanimal)經(jīng)人工培育,對其攜帶的微生物實行控制,遺傳學(xué)背景明確或者來源清楚,用于科學(xué)研究、教學(xué)、生物制品或藥品鑒定及其它科學(xué)實驗的動物。簡單記憶:人工培育、來源清楚、用于科研的動物。2.實驗用動物(Experimentalanimal)用于實驗的動物統(tǒng)稱為實驗用動物。包括實驗動物經(jīng)濟動物和野生動物等。3.
實驗動物科學(xué)(LaboratoryAnimalSciences)是研究有關(guān)實驗動物和動物實驗的一門新興科學(xué),是專門研究實驗動物的生物特性、飼養(yǎng)繁殖、遺傳育種、質(zhì)量控制、疾病防治和開發(fā)應(yīng)用的科學(xué)。任務(wù)是研究怎樣從優(yōu)質(zhì)的實驗動物和精確的實驗方法,使動物經(jīng)實驗處理后能獲得良好的反應(yīng)重復(fù)性。研究范疇包括實驗動物和動物實驗。具體包括實驗動物遺傳學(xué)、實驗動物生物學(xué)、實驗動物醫(yī)學(xué)、實驗動物比較醫(yī)學(xué)、實驗動物方法學(xué)和實驗動物生態(tài)學(xué)。4.實驗動物營養(yǎng)學(xué):營養(yǎng)是滿足實驗動物正常生長和繁殖的基本要求。
5.比較醫(yī)學(xué):研究實驗動物與人類的基本生命現(xiàn)象,特別對人類疾病進行類比研究,建立各種人類疾病動物模型,研究人類相應(yīng)疾病,了解人類疾病的發(fā)生、發(fā)展,認(rèn)識人類疾病的本質(zhì)和發(fā)展規(guī)律,以期找到治療人類疾病的有效藥物和治療措施。6.
實驗動物分四級:一級動物(普通動物)二級動物(清潔動物)三級動物(無特定病原體動物)四級動物(無菌動物)7.
3R原則:Reduction(減少)是指在科學(xué)研究中,使用較少量的動物獲取同樣多的試驗數(shù)據(jù)或使用一定數(shù)量的動物能獲得更多實驗數(shù)據(jù)的科學(xué)方法。Replacement(替代)是指使用其它方法而不用動物所進行的試驗或其他研究課題,以達到某一試驗?zāi)康;蛘呤鞘褂脹]有知覺的試驗材料代替以往使用神志清醒的活的脊椎動物進行試驗的一種科學(xué)方法。Refinement(優(yōu)化)是指在符合科學(xué)原則的基礎(chǔ)上,通過改進條件,善待動物,提高動物福利;或完善實驗程度和改進實驗技術(shù),避免或減輕給動物造成的與實驗?zāi)康臒o關(guān)的疼痛和緊張不安的科學(xué)方法。8.
實驗研究的四大基本要素(AEIR):A:Animal(動物),E:Equipment(設(shè)備),I:Information(信息),R:Reagent(試劑)。9.
實驗動物管理條例:1988年經(jīng)國務(wù)院批準(zhǔn)由國家科委以2號令發(fā)布了我國第一部實驗動物管理法規(guī)《實驗動物管理條例》。目前執(zhí)行的是201*年,科學(xué)技術(shù)部與衛(wèi)生部等七部(局)聯(lián)合發(fā)布《實驗動物許可證管理辦法(試行)》。
10.普通動物(Conventionalanimals)又稱一級動物,是微生
物學(xué)控制上要求最低的動物,它要求不攜帶人畜共患病和動物烈性傳染病的病原。
11.清潔動物(Cleananimal,CL)又稱二級動物,除普通動
物應(yīng)排除的病原外,不攜帶隊動物危害大和隊科學(xué)研究干擾大的病原。
12.無特殊病原體動物(specificpathogenfreeanimals,SPF):
又稱三級動物,是指是指動物體內(nèi)外均無寄生蟲和特定病原菌,但又不是絕對的無菌動物。
13.無菌動物(Germfreeanimal,GF):是指在無菌條件下,
用無菌飼料、飲水飼養(yǎng)的動物,或經(jīng)腹部取胎后,轉(zhuǎn)移到無菌條件下飼養(yǎng),體表及腸道內(nèi)均不能檢查出任何活的微生物和寄生蟲.
14.無菌動物的特點:消化系統(tǒng):無菌動物盲腸的總重量是普
通動物的5~10倍,且盲腸膨大,腸壁菲薄,常易發(fā)生腸扭轉(zhuǎn)導(dǎo)致腸壁破裂而死亡,當(dāng)無菌動物被梭菌、類桿菌等單獨感染后,盲腸就會變小。血液循環(huán)系統(tǒng):心臟相對變小,白細胞數(shù)少,且數(shù)量波動范圍小,與病原體入侵無關(guān)。免疫系統(tǒng):胸腺中網(wǎng)狀上皮細胞體積較大,且胞漿內(nèi)泡狀結(jié)構(gòu)和溶酶體少。免疫功能處于原始狀態(tài),應(yīng)答隨度慢,過敏反應(yīng)、對異體移植物的排斥反應(yīng)一以及自身免疫現(xiàn)象消失或減弱。無菌禽類生長率高于同種普通禽類,無菌大小鼠與普通鼠差不多,無菌豚鼠和無盡兔子生長率比普通者慢。代謝:血中含氮量少,腸管對水的吸收率低代謝周期比普通動物長。營養(yǎng):無菌動物不能合成維生素B和K,估易產(chǎn)生這兩種維生素缺乏癥。無菌動物的抗輻射能力強。壽命長于普通動物。
15.悉生動物(Gnotobioticanimal)也稱已知定菌動物或已知定
菌叢動物(animalwithknownbacterialflora)是指在無菌動物體內(nèi)植入已知的微生物的動物。
16.近交系動物(InbredStrainAnimals):經(jīng)至少20代的全同
胞兄妹交配或親代與子代交配培育而成,品系內(nèi)所有個體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先的動物群。20代以上近交以后,個體有98.6%以上的漁船位點是純合的。
17.近交系亞系(Substrain)的形成:可能由于殘余雜合性合
突變而導(dǎo)致部分遺傳組成的改變。亞系的命名:是在原品系的名稱后加一道斜線,斜線后標(biāo)明亞系的符號,如DBA/2、C57BL/6J等。
18.近交類型:①純交(Incross)AaxAA②回交(Backcross)
AaxAa③互交(Intercross)AaxAa
19.近交衰退(Inbreedingdepression)近親交配所產(chǎn)生的后代
常常出現(xiàn)生長、成活、生育、抗病、適應(yīng)環(huán)境等能力減退的現(xiàn)象。
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20.引起近交衰退主要的原因:①隱性有害基因的暴露。②破
壞多基因的平衡。
21.常用的近交系動物有:BALB/c、C3H、C57BL、TA1、TA2、
615、DBA/2小鼠、F344、SHR、LEW、ACI大鼠等。22.近交系動物的特征:⑴遺傳基因位點純合性
(Homozygosity)概率高。⑵遺傳組成的同源性(Isogenicity)。⑶長期遺傳穩(wěn)定性(Stability)。⑷遺傳特征的可辨性(Identifiability)。⑸表型一致性(Uniformity)。⑹對外界因素的敏感性(Sensitivity)很高。⑺遺傳組成的獨特性(Individuelity),品系遺傳獨一無二。⑻生活力(Vigour)較低。⑼國際分布(Internationaldistribution)廣泛。⑽背景資料(Backgroundcost)清晰。⑾生產(chǎn)飼養(yǎng)成本(Productioncost)較高。
23.近交系動物的命名:普通近交系命名一般用1~4個大寫
字母表示,有些品系可由大寫字母為首結(jié)合數(shù)字,非正規(guī)但已經(jīng)被國際廣泛認(rèn)同的,也可以保留,近交代數(shù)表示用“Fn”n即代表代數(shù)。
24.近交系動物優(yōu)點:⑴具有相同的基因型,表現(xiàn)型也一致,
所以其反應(yīng)是一致的,實驗結(jié)果正確、可靠。⑵各品系均有其獨特的特征,根據(jù)實驗?zāi)康目蛇x用不同品系來作實驗,實驗重復(fù)性好,所用動物少,實驗周期短、節(jié)省人力、物力和時間。⑶國際分布廣泛,不同國家的科研單位由于使用同一近系動物所得結(jié)果是相似的,便于學(xué)術(shù)交流和實驗重復(fù)。⑷疾病模型、致癌品系、抗癌品系、白血病等。⑸遺傳背景明確,其生物特性、生理生化特點,常見疾病等都有系統(tǒng)研究,便于選擇應(yīng)用。
25.封閉群(Closedcolony)不以近交形式進行交配,也不引
入任何外來血緣在封閉條件下交配繁殖,從而保持了群體的一般遺傳特征,又具有雜合性,稱為封閉群,也稱遠交系。
26.封閉群動物的特點:⑴保持一定的雜合性。⑵保持相對穩(wěn)
定性。⑶個體差的大小取決于祖代。⑷繁殖力、抗病力強。⑸群體中存在有模型價值的突變基因。
27.封閉群動物的命名:除了一些由歷史原因已廣泛使用的名
稱(如:NewZealand兔、DunkinHartley豚鼠)外,一般應(yīng)該用2~4個大寫羅馬字母進行命名(如NIH小鼠合ICR小鼠),還有一般在大學(xué)字母之前加上由一個大寫字母合1~3個小寫字母構(gòu)成的培養(yǎng)者或者保持者的符號(如N:NIH是由美國國立衛(wèi)生研究院保持的NIH小鼠)。冒號即是封閉群動物和近交系動物命名中最顯著的差別.28.常用的封閉群動物有:昆明種(KM)小鼠、NIH小鼠、
LACA小鼠、ICR小鼠、Wistar大鼠、SD(Sprague-Dawey)大鼠、DunkinHartley豚鼠、大耳白兔、青紫蘭兔、NewZealand兔。
29.雜交群動物:兩個近交品系之間進行有計劃交配所獲得的
第一代動物,簡稱F1動物。如AKR和DBA/2小鼠交配后的第一代動物為AKD2F1,其遺傳組成均等的來自兩個近交品系,屬遺傳均一。
30.雜交群動物的命名:習(xí)慣寫法是把親代母系符號寫在前邊
以“x”鏈接,后邊是父系,再寫上F1。
31.雜交群動物的特征:⑴具有雜交優(yōu)勢。⑵遺傳和表型上的
均質(zhì)性。⑶具有同基因性。⑷國際上分布廣泛。32.雜交群動物在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用:⑴干細胞研究,⑵一
致免疫的研究,⑶細胞動力學(xué)研究,⑷單克隆抗體研究,⑸做某些疾病的模型。
33.突變系動物(MutantStrainAnimals):通過自然突變和人
工定向誘導(dǎo)突變的方法,使正常染色體基因發(fā)生了變異的,并具有各種遺傳缺陷的動物
34.免疫缺陷動物:是指由于先天性遺傳突變或用人工方法造
成一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動物。35.免疫缺陷動物分類:自發(fā)性、誘發(fā)性免疫缺陷動物36.裸小鼠的生物學(xué)特性:先天性無胸腺,裸體,母性差。由
于無胸腺,僅有胸腺殘跡或異常上皮,這種上皮不能使T細胞正常分化,因而細胞免疫功能低下。B細胞正常,但功能欠正常。NK細胞活性正常。免疫球蛋白主要是IgM,只含少量的IgG。
37.裸大鼠的生物學(xué)特性:只有胸腺殘體,無淋巴細胞。T細
胞功能喪失。
38.性連鎖免疫缺陷小鼠(XID)的生物學(xué)特性:B細胞功能
缺陷。XID來源于CBA/N品系,其B細胞功能減退,T細胞功能沒有缺陷。
39.Beige小鼠為內(nèi)源性NK細胞活性缺乏,缺乏細胞毒T細
胞反應(yīng)。
40.嚴(yán)重免疫缺陷小鼠(severecombinedimmunodeficient
mice,SCID小鼠):位于16號染色體的單個隱性突變基因所致。VDJ重組酶缺陷,而使編碼Ig和TCR的基因發(fā)生異常改變,導(dǎo)致淋巴細胞分化被阻止在T、B前體階段。T、B細胞數(shù)量大大下降,造成細胞和體液免疫功能缺陷,但非淋巴性造血細胞、NK細胞和LAK細胞呈正常狀態(tài)。41.滲漏現(xiàn)象:少數(shù)SCID小鼠在飼養(yǎng)過程中可出現(xiàn)極少程度
的免疫功能恢復(fù),此為SCID小鼠的滲漏現(xiàn)象。42.人體腫瘤裸鼠移植瘤的生物學(xué)特征:(1)保持原發(fā)瘤的病理
形態(tài)學(xué)、染色體特征、腫瘤標(biāo)記物等特點。(2)多數(shù)腫瘤呈結(jié)節(jié)狀生長,周圍有膜包裹,極少可有局部侵潤和遠處轉(zhuǎn)移,其組織形態(tài)、超微結(jié)構(gòu)等均保持移植前腫瘤的特征。(3)傳代的移植瘤能保持腫瘤的機能。如原發(fā)腫瘤的分泌特性。AFP,HBsAg,CEA。(4)裸鼠不能再現(xiàn)人體原發(fā)瘤的
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全部特征及其遺傳學(xué)上的不穩(wěn)定性。(5)裸鼠對移植瘤的反應(yīng)
43.裸鼠腫瘤移植模型具有以下優(yōu)點:(1)裸鼠體內(nèi)免疫缺陷機
制恒定,其它鼠類需另加去免疫措施,其條件恒定性受個體差異的影響。⑵可以控制腫瘤的致癌性,使人體腫瘤移植后良好生長。⑶接種成功的瘤組織具有原腫瘤的結(jié)構(gòu)特點,有利于體外培養(yǎng)的瘤細胞株的鑒定。⑷研究腫瘤在體內(nèi)的生長行為與過程,探討腫瘤與宿主免疫間的相互關(guān)系。
44.裸鼠腫瘤移植模型缺點:①由于雌性裸鼠(nu純合子)的不
育性,導(dǎo)致生育率低下。②不能完全接受異種移植物,例如人體腫瘤和淋巴組織,而且不同起源的人腫瘤在裸鼠身上的可移植性差異很大。
45.遺傳性狀分為質(zhì)量性狀和數(shù)量性狀,目前遺傳檢測方法主
要用于近交系。
46.遺傳檢測主要的方法:(1)質(zhì)量遺傳性狀:①形態(tài)學(xué)檢查,
常用檢測方法是毛色基因檢測,即利用毛色的表型分離可以推斷近交系的毛色基因。②生物化學(xué)檢查,常用生物化學(xué)標(biāo)記基因檢測法,選擇一些在品系間具有多態(tài)性的同工酶和異構(gòu)蛋白作為生化標(biāo)記,它們的基因即為生化標(biāo)記基因。③免疫學(xué)標(biāo)記檢測,常用檢測方法有免疫標(biāo)記檢測法、皮膚移植法、混和淋巴細胞培養(yǎng)法、腫瘤移植法和血清反應(yīng)法。④細胞遺傳學(xué)檢測,常用染色體帶型。⑤分子生物學(xué)檢測,常用方法有RFLP、STR、DNAfingerprinting,RAPD和SNP。⑵數(shù)量遺傳性狀:常用下頜骨測定法和生物學(xué)特性檢測法。
47.轉(zhuǎn)基因動物(Transgenicanimals)是通過基因工程對DNA
進行體外操作,添加或刪除一個特殊的DNA序列,然后導(dǎo)入早期的胚胎細胞中,所產(chǎn)生遺傳結(jié)構(gòu)得以修飾的動物,其改變的性狀可以遺傳給后代。
48.小鼠的特性:①對外來刺激極為敏感,適應(yīng)性差,強光或
者噪聲刺激時,可能導(dǎo)致哺乳母鼠神經(jīng)紊亂,發(fā)生食仔現(xiàn)象。溫度過高或過低時,生殖能力下降,嚴(yán)重會發(fā)生死亡。小鼠無汗腺,尾有四條血管,靜、動脈各兩條。小鼠胃容量小,約1~1.5ml。小鼠交配后10~12小時,雌鼠仔陰道口形成一個白色的陰道栓,這是受孕標(biāo)志。
49.小鼠的主要品系:近交系有C57BL/6、C3H/He、BALB/c、
DBA/2、AKR、TA1和TA2。封閉群有KM、NIH、ICR50.小鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用有藥物評價和毒性評價、腫
瘤學(xué)研究、傳染性疾病的研究、遺傳學(xué)和遺傳性疾病的研究、老年病學(xué)研究、計劃生育研究和免疫研究。51.近交系小鼠自發(fā)性腫瘤發(fā)病率很高,如AKR小鼠白血病
發(fā)生率可達90%,C3H小鼠乳腺癌發(fā)病率達97%,嚴(yán)重
免疫缺陷小鼠,如裸鼠、SCID小鼠可接受各種人類腫瘤細胞的植入。
52.大鼠的特性:嗅覺發(fā)達,味覺很差,對營養(yǎng)缺乏非常敏感,
特別是維生素A和氨基酸供應(yīng)不足時,可發(fā)生典型的缺乏癥狀。對飼養(yǎng)環(huán)境中濕度極為敏感,相對濕度低于40%時,易患環(huán)尾病,還會引起哺乳母鼠食仔現(xiàn)象發(fā)生。大鼠汗腺極部發(fā)達,僅在爪墊上有汗腺。無膽囊,無嘔吐反應(yīng)。無扁桃體、眼角膜無血管。肝臟再生能力強。垂體-腎上腺系統(tǒng)功能發(fā)達,應(yīng)激反應(yīng)靈敏。垂體脆弱地附著于漏斗下部。心電圖中沒有ST段
53.大鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用:內(nèi)分泌研究大鼠垂體-腎上
腺系統(tǒng)發(fā)達,應(yīng)激反應(yīng)靈敏,適宜作應(yīng)激模型。大鼠對營養(yǎng)缺乏比較敏感,是研究營養(yǎng)學(xué)的首選動物。大鼠對化學(xué)致癌物質(zhì)敏感,可復(fù)制成各種腫瘤模型,是腫瘤實驗研究最常用的實驗動物之一。大鼠肝再生能力強,切除60~70%的肝葉仍有再生能力。大鼠無膽囊,可從膽管直接收集膽汁,可用于膽道疾患、消化功能及急性肝功衰竭模型。大鼠血壓和血管阻力對藥物反應(yīng)敏感,適合研究心血管藥物的藥理和藥物篩選。大鼠踝關(guān)節(jié)對炎癥反應(yīng)敏感。54.大鼠常用品系及其特點:近交系常用SHR,其自發(fā)高血壓,
心血管疾病發(fā)病率高。對降壓藥物有反應(yīng),可用于降壓藥物篩選的動物模型。封閉群常用(1)Wistar:對營養(yǎng)物質(zhì)敏感,垂體腎上腺系統(tǒng)發(fā)達。(2)SD:自發(fā)乳腺癌高。突變?nèi)撼S冒變?nèi)障大鼠、肥胖癥大鼠。
55.豚鼠的生物學(xué)特性和解剖生理特點:①對抗生素極為敏感
(青霉素、四環(huán)素)。②晚成性動物,即母鼠懷孕期較長。③體內(nèi)不能合成維生素C。④耳窩管敏感,便于做聽力實驗。⑤對一些細菌、病毒敏感。⑥易引起變態(tài)反應(yīng)。56.豚鼠生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用:在免疫學(xué)研究方面,豚鼠血
清中含有豐富的補體,免疫學(xué)實驗中所用補體多來源于豚鼠。在傳染病研究方面對許多病原微生物都十分敏感,尤其是結(jié)核桿菌高度敏感,感染后酷似人類的病變。在藥理學(xué)研究方面,豚鼠皮膚對毒物刺激反應(yīng)靈敏,并近似于人類,可用于局部皮膚毒物作用的實驗。在營養(yǎng)學(xué)方面,豚鼠體內(nèi)部能合成維生素C,對其缺乏十分敏感,是研究實驗性壞血病和維生素C生理功能的理想動物模型。在耳科學(xué)方面,常用于聽覺和內(nèi)耳疾病的研究。
57.地鼠的生物學(xué)特性和解剖生理特點:①頰囊。地鼠頰囊缺
少腺體和完整的淋巴通路,因此對外來組織部產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng),可用于異體移植。②生殖周期短,妊娠期平均為16天,為嚙齒類動物妊娠期最短者。③熟睡時,全身松弛,如死亡狀,不易弄醒。
58.地鼠在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用:腫瘤學(xué)研究方面,地鼠的頰
囊可移植正常組織或腫瘤的組織細胞,最適合誘發(fā)支氣管
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肺癌和肺腫瘤。生理學(xué)研究方面,地鼠成熟早、妊娠期短,人精子能穿透金黃地鼠卵子的透明帶。還可作老化、冬眠、行為、內(nèi)分泌的研究。營養(yǎng)學(xué)研究方面,維生素缺乏癥的研究。牙科研究方面,廣泛用于齲齒研究。
59.兔的生物學(xué)特性和解剖生理特點:家兔屬于恒溫動物。有
食糞癖。胸腔內(nèi)構(gòu)造與其它動物不同,縱隔將胸腔分左右兩室,互不相通。暴露心臟時,動物不需做人工呼吸。頸神經(jīng)血管束中減壓神經(jīng)易于分離,其末梢分布在主動脈弓血管內(nèi),屬于傳入性神經(jīng)。耳大,血管清晰。眼球巨大。對體溫變化十分靈敏。兔是反射性排卵的動物,交配后10~13小時排卵。
60.兔在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用:免疫學(xué)研究;生殖生理研究;
動脈粥樣硬化研究;眼科研究;熱源質(zhì)實驗。61.兔的常用品種有中國本兔、青紫藍兔、新西蘭白兔。62.犬的生物學(xué)特性和解剖生理特點:嗅覺、聽覺靈敏。神經(jīng)
系統(tǒng)發(fā)達,能較快的建立條件反射。觀察力和記憶力很強。嗅腦、嗅覺器官和嗅神經(jīng)極為發(fā)達。汗腺很不發(fā)達。胰腺小并且是分離的,易摘除。視覺較差,紅綠色盲。正常犬鼻尖呈油狀滋潤
63.犬的生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用:實驗外科學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實驗
研究、人類傳染性疾病研究、藥物學(xué)和毒理學(xué)研究等。64.犬的常用品系有比格犬、四系雜交犬、紐芬蘭犬等65.獼猴的生物學(xué)特性和解剖生理特點:體內(nèi)缺乏維生素C合
成酶;頰囊;對痢疾桿菌和結(jié)核桿菌極敏感,并常攜帶有B病毒;獼猴有發(fā)達的神經(jīng)系統(tǒng)性皮膚;猴的大腦發(fā)達,具有大量的腦回和腦溝;視覺較人敏感;猴也有色覺,能分辨物體各種顏色,它還具有雙目視力。
66.獼猴在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用:在生理學(xué)研究方面,可用
于腦功能、血液循環(huán)、血型、呼吸生理、內(nèi)分泌、生殖生理、神經(jīng)生理等研究。在傳染病研究和疫苗試驗中,非人靈長類是某些人類傳染病病原除人以外的唯一易感動物。在制造和鑒定脊髓灰質(zhì)炎疫苗時,獼猴是唯一的實驗動物。
豬的生物學(xué)特性和解剖生理特點:雜食性動物,舌體味蕾能感覺甜味;豬和人類的皮膚組織結(jié)構(gòu)和上皮修復(fù)再生性很相似;豬的臟器重量近似于人;豬的胎盤類型屬上皮絨毛膜型,沒有母源抗體;豬的心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、皮膚、營養(yǎng)需要、骨骼發(fā)育以及礦物質(zhì)代謝等與人的情況極其相似;豬的賁門腺占胃的大部,故其食量大。
67.豬在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用:小型豬的皮膚與人類非常相
似,故小型豬是進行實驗性燒傷研究的較理想動物。烏克坦小型豬(墨西哥無毛豬)是糖尿病研究中的一個很好的動物模型。小型豬的冠狀動脈循環(huán)在解剖和血液動力學(xué)方
面與人類很相似,因此小型豬是研究動脈粥樣硬化很好的動物模型。無菌、悉生豬還能提供心瓣膜供人心瓣膜修補。68.實驗動物設(shè)施按國標(biāo)分為普通環(huán)境(符合動物居住的基本
要求,適用于普通級動物),屏障環(huán)境(適用于飼養(yǎng)清潔實驗動物及無特定病原體實驗動物),隔離環(huán)境(采用無菌隔離裝置以保持無菌或無外來污染的狀態(tài),適用于飼養(yǎng)無特定病原體、悉生及無菌實驗動物)。
69.
動物實驗設(shè)施環(huán)境(靜態(tài))指標(biāo)要求見下表:重要的人畜共患。孩趴袢,⑵流行性出血熱,⑶脈絡(luò)叢腦膜炎,⑷B病毒病,⑸弓形蟲。ㄘ垼噬抽T氏菌病,⑺鉤端螺旋體病,⑻結(jié)核分支桿菌,⑼鼠痘,⑽兔出血熱,⑾仙臺病毒,⑿小鼠肝炎,⒀支原體,⒁巴氏桿菌,⒂呼腸孤病毒III型,⒃球蟲病,⒄犬瘟熱,⒅犬細小,⒆傳染性犬肝炎。
71.實驗動物所需營養(yǎng)種類50余種,其中最主要的為七大類:
蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、礦物質(zhì)、維生素、水以及纖維素。
環(huán)境因素對動物實驗效果的影響:當(dāng)環(huán)境溫度過低時,常導(dǎo)致哺乳類實驗動物性周期的推遲,而溫度超過30oC時,雄性動物則出現(xiàn)睪丸萎縮,產(chǎn)生精子的功能下降;雌性動物出現(xiàn)性周期紊亂,泌乳能力下降或拒絕哺乳,妊娠率下降。在高濕的情況下有利于病原微生物和寄生蟲的生長繁殖,墊料與飼料容易發(fā)生霉變,對動物健康不利。在低濕情況下,大小鼠的哺乳母鼠常發(fā)生拒哺乳或吃仔鼠現(xiàn)象,甚至仔鼠發(fā)育不良;低濕使室內(nèi)灰塵飛揚,容易引起動物呼吸道疾病。
自發(fā)性動物模型:是指實驗動物未經(jīng)任何人工處置,在自然條件下自然發(fā)生的,或由于基因突變的異常表現(xiàn),通過遺傳育種保留下來的動物模型。
實驗動物總結(jié)(小月壓縮版)(201*級碩士隊)
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第一章緒論
1、實驗動物與實驗用動物
實驗動物:指經(jīng)人工培育,對其攜帶的微生物進行控制,遺傳背景明確,可用于科學(xué)實驗、藥品、生物制品的生產(chǎn)和檢定及其它科學(xué)研究的動物。
實驗用動物:一切可以用于實驗的動物。
區(qū)別:遺傳控制不同、微生物控制等級不同、培養(yǎng)的形質(zhì)和目標(biāo)不同。
2、按遺傳學(xué)控制標(biāo)準(zhǔn)即基因的純合成度,實驗動物分為:近交系-C3H、突變系-裸鼠、雜交群-F1、封閉群-昆明小鼠
3、實驗動物標(biāo)準(zhǔn)化:對動物的質(zhì)量,繁育條件,實驗條件等方面規(guī)定的統(tǒng)一技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。內(nèi)容:實驗動物遺傳學(xué)質(zhì)量控制;實驗動物微生物學(xué)質(zhì)量控制;實驗動物設(shè)施環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)化;實驗動物飼料營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)化;
4、突變系動物:指正常染色體的基因發(fā)生了變異,具有一種或多種遺傳缺陷的動物。5、醫(yī)藥研究中動物選擇的原則:(1)選擇與人的機能、代謝、結(jié)構(gòu)及疾病特點相似的實驗動物;(2)選擇遺傳背景明確,得到良好微生物控制,具有模型性狀顯著且穩(wěn)定的LA;(3)選擇解剖、生理特點符合實驗?zāi)康囊蟮腖A;(4)選擇靶器官效應(yīng)好的LA;(5)選擇科研、檢定及生產(chǎn)中傳統(tǒng)使用的LA;(6)選擇具有特殊反應(yīng)性的實驗動物品種(系)。
第二章實驗動物質(zhì)量控制
1.1、相同基因類型動物:指所有個體的遺傳背景相同或相近的實驗動物。主要指近交系動物,其中包括同源突變近交系、同源導(dǎo)入近交系、重組近交系和雜交一代動物。
1.2、不同基因類型動物:指所有個體的遺傳背景具有較大差異的實驗動物,主要是指封閉群。1.3、品種、品系具備的條件:A.相似的外貌特征;B.獨特的生物學(xué)特性;C.穩(wěn)定的遺傳性能;D.共同的遺傳來源和一定的遺傳結(jié)構(gòu)。
1.4、近交系:指至少連續(xù)20代全同胞兄妹或親子交配,品系內(nèi)所有個體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先,且近交系數(shù)達98.6%以上遺傳物質(zhì)高度純合和穩(wěn)定的遺傳群體。特征:基因純合性;同基因性;遺傳穩(wěn)定性;可識別性;表現(xiàn)型一致性;個體性;資料的可查性;國際分布的廣泛性。
1.5、近交衰退:指近交使生物個體的生活力、生產(chǎn)性能、群體均值、抗病力、適應(yīng)環(huán)境能力等都減退的現(xiàn)象。原因:(1)有害隱性基因的暴露;(2)多基因控制性狀平衡被破壞?刂品椒ǎ(1)控制近交系數(shù)F;(2)嚴(yán)格淘汰。
1.6、特殊類型的近交系A(chǔ).同源突變近交系:指某個近交系的某個指明位點的等位基因發(fā)生突變而分離出來的近交系亞系,它與原近交系的區(qū)別只是突變位點的基因不同而已(如:裸鼠)。
B.同源導(dǎo)入近交系:指通過雜交-互交或回交等方式將一個差異基因?qū)氲侥硞近交系中,由此形成的一個近交系,該近交系與原來近交系只是一個很小染色體片斷上的基因不同。
C.重組近交系:由兩個高度無關(guān)的近交系雜交產(chǎn)生F2代后,再從F2代中隨機選擇個體配對,連續(xù)進行20代以上全同胞兄妹交配而育成的一個近交系列動物。為重組近交系提供親代的兩個近交系稱為祖系。特點:具有其雙親品系的特征;具有重組后一組內(nèi)和每個重組近交系的特征,并具有新的多態(tài)性基因位點;和近交系一樣具有極高的純合性。
D.雜交一代(又稱F1代):用2個基因型不同的近交系動物相互交配產(chǎn)生的第一代動物,即為F1代動物。(雜交F1代動物不是一個品種或品系,因為它不具有育種功能)。特點:具有遺傳和表型一致性;基因型一致;與近交系相比具有雜交優(yōu)勢;國際分布廣泛;F1代動物品質(zhì)的好壞完全取決于2個親代。
1.7、封閉群:在不從外部引入新的血緣條件下,以非近親交配的方式至少連續(xù)繁殖4代以上的群體。特點:A.封閉群動物避免了近親交配,具有較強的繁殖力和生活力;B.封閉群動物具有類似于人類群體遺傳異質(zhì)性的遺傳組成;C.封閉群動物中存在有模型價值的突變基因,通?蓪(dǎo)致動物某些方
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面的異常;D.封閉群動物的遺傳組成具有很高的雜合性;E.封閉群動物因其攜帶大量的隱性有害基因,可用于估計群體對自發(fā)或誘發(fā)突變的遺傳負荷能力。
2.1、按微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)分級(4級五種):國際分三級(普通級、無特定病原體動物、無菌動物),我國分四級(清潔動物)。
普通級動物:指飼養(yǎng)在普通環(huán)境中,在微生物控制上要求最低的動物,它要求不攜帶人獸共患病和動物烈性傳染病的病原。
清潔動物:除不帶有普通級動物應(yīng)排除的病原外,還不應(yīng)攜帶對動物危害大和對科學(xué)研究干擾大的病原。
無特定病原體動物:指動物體內(nèi)無特定的微生物和寄生蟲存在,但帶有非特定的微生物和寄生蟲的動物。
無菌動物:指用現(xiàn)有的檢測技術(shù)在動物體內(nèi)外的任何部位均檢不出任何活的微生物和寄生蟲的動物。
悉生動物GN:指在無菌動物體內(nèi)植入已知微生物的動物。
2.2、感染病原微生物的危害:引起實驗動物的疾病和死忙;干擾動物實驗結(jié)果;人獸共患。挥绊懮镏破返馁|(zhì)量。
2.3、主要的人獸共患傳染病5和烈性傳染病的臨床癥狀2
流行性出血熱EHF:人感染表現(xiàn)高熱、低血壓、少尿、多尿與恢復(fù)期五期臨床特征;實驗大鼠和野鼠感染不表現(xiàn)臨床癥狀,無病理變化。
淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎LCM:鼠出現(xiàn)癥狀與毒株、鼠齡、品系和感染途徑有關(guān),可表現(xiàn)為大腦型、內(nèi)臟型和發(fā)育不良型,但一般為隱性感染;人感染后表現(xiàn)為流感樣癥狀或腦膜炎,預(yù)后良好。
狂犬病:狂暴型可分三個時期(前驅(qū)期、興奮期、麻痹期);麻痹型全身肌肉麻痹,始見于頭部肌肉,表現(xiàn)吞咽困難,隨后四肢麻痹,最終全身麻痹而死亡;病理學(xué)表現(xiàn)為非化膿性腦炎和神經(jīng)炎。
猴B病毒。汉锔腥綛病毒后,初期在舌表面和口腔粘膜與皮膚交界的唇緣有皰疹,最后形成潰瘍表面,有纖維素性壞死痂皮,7-14天自愈,不留疤痕;人感染后癥狀非常嚴(yán)重,主要呈上行性脊髓炎或腦脊髓炎,死亡率高。
結(jié)核TB:猴一般不出現(xiàn)臨床癥狀,嚴(yán)重時可見咳嗽、消瘦,呼吸困難,聽診有音,體溫升高不明顯,X線檢查可見明顯的結(jié)核陰影;淋巴結(jié)腫大、脾和肝腫大,形成彌散性的黃白色干酪樣病灶;皮膚可出現(xiàn)結(jié)核性結(jié)節(jié),有滲出物。
鼠痘:急性致死型:多見于初次發(fā)病的鼠群,患鼠于4-12小時死亡;病理變化可見肝壞死嚴(yán)重,脾、腸也有壞死灶。亞急性型-慢性經(jīng)過型:出現(xiàn)皮疹,潰爛、壞死,以四肢、頭尾最為嚴(yán)重。無癥狀耐過型:動物外觀健康無病變,但在小鼠體內(nèi)有病毒增殖。
兔出血癥RHD:急性型:無任何癥狀突然死亡,有時鼻腔流出血性分泌物。亞急性型:食欲驟減,體溫高達41℃以上,呼吸困難,鼻腔流出血性分泌物。慢性型:一般發(fā)生在流行的后期,病兔精神欠佳,病程較長,最后衰弱而死或耐過而恢復(fù),成為帶毒者。
3.1、實驗動物環(huán)境:指實驗動物生長發(fā)育、繁殖交配、實驗處理等賴以生存的所有外部條件的總和。(氣候因素、理化因素、生物因素、居住因素、營養(yǎng)因素)
3.2、根據(jù)微生物控制程度的不同將動物設(shè)施分為三類:
普通(開放)環(huán)境:符合動物居住的基本要求;不能完全控制傳染因子;適用于飼育教學(xué)等用途的普通級實驗動物;該設(shè)施內(nèi)空氣與外界環(huán)境相通,但有必要的防野鼠、蚊蠅設(shè)施。
屏障環(huán)境:適用于飼育清潔級及無特定病原體(SPF)實驗動物;進入系統(tǒng)的空氣應(yīng)經(jīng)過初、中、高效三級過濾;空氣的潔凈度達到萬級;進入設(shè)備的動物、飼料、水、墊料、實驗用品均需有嚴(yán)格的微生物控制;人員須經(jīng)淋浴、更換滅菌服方可進入室內(nèi)。
隔離環(huán)境:采用無菌隔離裝置以保證無菌或無外來污染;隔離裝置內(nèi)的空氣、飼料、水、墊料和設(shè)備均為無菌,動物和物料的動態(tài)傳遞須經(jīng)特殊的傳遞系統(tǒng);該系統(tǒng)既能保證與外環(huán)境的絕對隔離,又能滿足轉(zhuǎn)運動物時保持與內(nèi)環(huán)境的一致;該設(shè)施適用于飼育SPF、悉生及無菌動物。
3.3、感染動物實驗設(shè)施生物危害程度分級(四級):
危害等級Ⅰ(低個體危害,低群體危害):不會導(dǎo)致健康工作者和動物致病的生物因子。
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危害等級II(中等個體危害,有限群體危害):引起人或動物發(fā)病,但一般不會引起嚴(yán)重危害的病原體。
危害等級III(高個體危害,低群體危害):引起人類或動物嚴(yán)重疾病,傳染性不強,有有效的治療藥物。
危害等級IV(高個體危害,高群體危害):引起人或動物非常嚴(yán)重的疾病,一般不能治愈,容易在人與動物間相互傳播。
3.4、人員、物品進入屏障設(shè)施的流程
人員:更衣-淋浴-更滅菌衣-潔凈走廊-動物實驗室-污染走廊-洗消室-更衣-外部。物品:雙扉高壓蒸汽滅菌器-帶紫外線消毒的傳遞窗-盛滿消毒液的不銹鋼渡槽。
動物:引入的動物應(yīng)為相同的等級;引進的動物需有明確的動物品種/系、性別、數(shù)量、出生日期和質(zhì)量合格證及遺傳背景資料等;動物到達后應(yīng)先檢查運輸盒的密封材料的完整性;驗收后,按以下順序?qū)游飩魅耄簞游?專用包裝盒)-傳遞窗-檢疫室-清潔走廊-飼育室或?qū)嶒炇遥?實驗后或生產(chǎn)供應(yīng))(經(jīng)包裝)污染走廊外部。
3.5、實驗動物環(huán)境空氣潔凈度要求:普通環(huán)境(無)、屏障環(huán)境(1萬)、亞屏障環(huán)境(10萬)、隔離環(huán)境(100)
4.1、營養(yǎng)素:指生物體為了維持生命而從外界以食物形式攝入的必需物質(zhì)。
4.2、營養(yǎng)需要:為滿足動物維持正常生長和繁殖所需的各種營養(yǎng)素的需要量。根據(jù)動物的品種、年齡及生理狀態(tài)將其營養(yǎng)需要分為生長、繁殖和維持三種。
4.3、飼料常用消毒法:干熱法(80~100℃烘烤,營養(yǎng)成分損失多)、高溫高壓法(121℃
60/1.0Kg/cm2/15min,營養(yǎng)成分損失少,但維生素破壞多)、Co照射法(營養(yǎng)成分損失少,費用高)。
在飼料學(xué)中,賴氨酸被稱為第一限制性AA,蛋氨酸則被稱為第二限制性AA。
第三章常用實驗動物的特性
屬于嚙齒類動物的有:大鼠、小鼠、地鼠、豚鼠屬于食草類動物的有:豚鼠、兔
不能自行合成維生素C的有:豚鼠、猴子無膽囊的有:大鼠、中國地鼠有頰囊的有:地鼠、猴子刺激性排卵的是:兔1、小鼠生物學(xué)特性:(1)全身被毛,面部尖突,尾部被有短毛和環(huán)狀角質(zhì)鱗片;(2)體型小,生長快,易于飼養(yǎng)管理;(3)性情溫馴,膽小怕驚,對外界反應(yīng)敏感;(4)成熟早,繁殖力強:一般雌鼠在35~45日齡、雄鼠在45~60日齡性成熟;一般每胎產(chǎn)仔數(shù)6~15只,1年產(chǎn)仔胎數(shù)6~10胎;壽命2~3年;(5)喜歡光線較暗的安靜環(huán)境,晝伏夜出;(6)喜群居并喜啃咬。
【A.小鼠的下頜骨的喙?fàn)钔惠^小,髁狀突發(fā)達,運用下頜骨形態(tài)的分析技術(shù),可進行近交系小鼠遺傳監(jiān)測;B.小鼠灌胃給藥的劑量一般不超過1.0ml;C.成年雌鼠交配后陰道口有白色的陰道栓,這是受孕開始的標(biāo)志;D.小鼠為全年多發(fā)情動物,發(fā)情周期可分為發(fā)情前期、發(fā)情期、發(fā)情后期和發(fā)情休息期四個階段,每個階段陰道黏膜均發(fā)生典型變化,通過陰道涂片可判斷處于哪個階段】
2、小鼠的應(yīng)用:(1)藥物研究;(2)病毒、細菌和寄生蟲病學(xué)研究;(3)腫瘤學(xué)研究;(4)遺傳學(xué)研究;(5)免疫學(xué)研究;(6)其他
3、大鼠生物學(xué)特性:(1)外貌與小鼠相似,但體型較大,尾上覆有短毛和環(huán)狀角質(zhì)鱗片;(2)晝伏夜動,雜食;(3)性情較兇猛,尤其是哺乳期容易咬人,成年大鼠抗病力較強;(4)對空氣中的灰塵、氨、硫化氫極為敏感;(5)對噪音敏感;(6)對營養(yǎng)缺乏非常敏感;(7)對濕度要求嚴(yán)格,如濕度低于40%時,易發(fā)生環(huán)尾病;(8)肝切除60%~70%后可再生,無膽囊,不能嘔吐。
4、大鼠的應(yīng)用:(1)大鼠是肥胖研究的模型動物;(2)大鼠是高血壓研究的模型動物;(3)大鼠是神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究的模型動物;(4)藥物研究。
5、豚鼠生物學(xué)特性:(1)豚鼠體形短粗,無尾,四肢較短,耳殼較薄,上唇分裂;(2)性情溫順,
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膽小易驚,喜群居和干燥清潔的生活環(huán)境,聽覺較發(fā)達;(3)對抗生素極為敏感;(4)牙齒能終生生長;(5)出生被毛。
6、豚鼠的應(yīng)用:(1)免疫學(xué)研究;(2)微生物感染試驗;(3)局部皮膚毒物作用的實驗;(4)藥物研究;(5)耳科研究(聽力特別敏銳);(6)營養(yǎng)學(xué)研究:研究維生素C生理功能的重要動物模型;(7)復(fù)制典型的急性肺水腫動物模型;(8)豚鼠缺氧耐受力強,是缺氧耐受性和測量耗氧量研究的首選動物。
7、地鼠生物學(xué)特性:(1)屬嚙齒類動物,雌鼠比雄鼠體型大;(2)有頰囊,尾短,嗜睡;(3)金黃地鼠成熟早,妊娠期短,氣溫在8~9℃時出現(xiàn)冬眠;(4)中國地鼠無膽囊,染色體數(shù)目少。
常用品種品系:金黃地鼠;中國地鼠(易自發(fā)糖尿。8、地鼠的應(yīng)用:(1)腫瘤學(xué);(2)生殖生理研究;(3)遺傳學(xué)研究;(4)傳染病研究;(5)糖尿病研究。
9、兔的生物學(xué)特性:(1)屬兔形目,具有夜行性;(2)膽小怕驚,嗅覺、聽覺靈敏;(3)喜獨居,厭濕喜干,耐寒怕熱;(4)屬草食動物,有食糞性;(5)腸道有圓小囊,后肢的淋巴結(jié)較大;(6)有眶下腺,甲狀旁腺較分散;(7)頸部減壓神經(jīng)獨立行走,胸腔結(jié)構(gòu)特殊;(8)體溫反應(yīng)靈敏,耳大,血管清晰;(9)屬刺激性排卵動物
常用品種品系:日本大耳白兔、新西蘭兔(最常用的實驗兔)、青紫蘭兔(用于某些生物制品的檢驗)、中國白兔(主要用于教學(xué)實驗)
10、兔的主要應(yīng)用:(1)發(fā)熱研究和熱原實驗;(2)免疫學(xué)研究;(3)皮膚反應(yīng)試驗;(4)眼科學(xué)研究;(5)心血管疾病和肺心病研究;(6)生殖生理及胚胎學(xué)研究
11、犬的生物學(xué)特性:(1)喜近人,易飼養(yǎng),歸家性強;(2)喜食肉,春秋兩季發(fā)情;(3)嗅覺、聽覺靈敏;(4)無精囊腺,前列腺發(fā)達;(5)汗腺不發(fā)達,鼻尖濕潤;(6)有5種血型,4種神經(jīng)類型;(7)視力差,紅綠色盲;(8)壽命為10-20年。
12、犬的應(yīng)用:(1)實驗外科;(2)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究;(3)慢性實驗;(4)藥理、毒理學(xué)研究13、小型豬生物學(xué)特性:屬偶蹄動物;豬和人的皮膚結(jié)構(gòu)很相似;豬和人的心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)相似。
主要品種:西藏小型豬、西雙版納小耳豬(近交系)3、貴州小型香豬14、小型豬的應(yīng)用:(1)皮膚燒傷的研究;(2)心血管病的研究
15、獼猴的生物學(xué)特性:屬靈長類動物,喜群居;屬雜食性動物,有頰囊,體內(nèi)不能合成維生素C;視力好,聽覺靈敏,嗅覺差;各器官系統(tǒng)與人相似,有月經(jīng)。
常用品種:恒河猴
16、獼猴的應(yīng)用:傳染病學(xué)研究;生理、藥理和器官移植研究17、實驗動物的妊娠期與性周期
小鼠:性周期為4~5天、妊娠期一般為19~21天,哺乳期一般為20~22天大鼠:雌鼠性周期為4~5天、妊娠期為19~23天豚鼠:性周期為13~20天,妊娠期長達65~70天
金黃地鼠:性周期30-32天,妊娠期14-17天,是妊娠期最短的哺乳類實驗動物兔:性周期約為15-16天
第五章動物模型
1、人類疾病動物模型:是指生物醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中所建立的具有人類疾病模擬性表現(xiàn)的動物實驗對象和相關(guān)材料。
意義:A.避免了在人類身上進行實驗所帶來的風(fēng)險;B.臨床上少見的疾病可隨時進行復(fù)制;C.可以克服人類某些疾病潛伏期長、病程長和發(fā)病率低的缺點;D.可以嚴(yán)格控制實驗的條件,增強實驗材料的可比性;E.可以簡化實驗操作和樣品采集;F.有助于更全面地認(rèn)識疾病的本質(zhì)。
分類:誘發(fā)性或?qū)嶒炐詣游锬P汀⒆园l(fā)性動物模型、陰性動物模型、孤立動物模型2、動物模型設(shè)計原則:相似性、重復(fù)性、可靠性、適用性和可控性、易行性和經(jīng)濟性
3、誘發(fā)性動物疾病模型:指用物理的、化學(xué)的或生物的致病因素作用于動物,造成動物組織、器
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官或全身一定的損害,出現(xiàn)某些類似人類疾病引起的功能、代謝或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變,即人為地誘發(fā)動物產(chǎn)生類似人類某種疾病。
優(yōu)點:制作方法簡便,實驗條件比較簡單,其它因素容易控制,在短時間內(nèi)可以復(fù)制大量的動物模型。
缺點:誘發(fā)動物模型與人類自然產(chǎn)生的疾病在某些方面存在差異。
4、自發(fā)性動物模型:指實驗動物未經(jīng)任何人工處置,在自然條件下所發(fā)生的疾病或由于基因突變的異常表現(xiàn)通過遺傳育種保留下來的動物疾病模型。自發(fā)性動物模型以遺傳疾病和腫瘤居多。
優(yōu)點:疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類相應(yīng)的疾病很相似,均是在自然條件下發(fā)生的疾病,應(yīng)用價值很高
缺點:種類有限,飼養(yǎng)條件要求高,尚不能普遍應(yīng)用
5、轉(zhuǎn)基因動物模型:是指染色體基因組中整合有外源基因并能遺傳給后代的一類動物
6、制備轉(zhuǎn)基因動物模型常用技術(shù):顯微注射法制備轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)、基因打靶技術(shù)、體細胞克隆技術(shù)。
基因打靶是指外源DNA與受體細胞染色體上的DNA靶序列之間發(fā)生序列依賴的同源重組,替代靶序列并整合在預(yù)定的特異位點,從而改變細胞遺傳特性的遺傳操作方法。
7、遺傳工程動物:人為地運用轉(zhuǎn)基因技術(shù)、基因敲除、轉(zhuǎn)基因體細胞核移植技術(shù)、ENU大規(guī)模誘變技術(shù)等,有目的地在基因水平改造動物的遺傳物質(zhì)組成,導(dǎo)致動物新性狀的出現(xiàn),并使其能有效地遺傳下去,形成新的可供生命科學(xué)研究和其它目的所用的動物模型。
主要用途:A.遺傳工程動物與基因功能研究;B.遺傳工程動物與人類疾病動物模型;C.遺傳工程動物與生物活性物質(zhì)生產(chǎn);D.遺傳工程動物與異種移植器官的生產(chǎn)。
8、模式生物:作為實驗?zāi)P鸵匝芯可F(xiàn)象的基本規(guī)律或研究人類健康問題的動物、植物和微生物。
9、免疫缺陷動物:是指由于先天性遺傳突變或用人工方法造成一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動物。
分類:先天性免疫缺陷動物(T淋巴細胞功能缺陷動物:裸鼠;B淋巴細胞功能缺陷動物:CBA/N小鼠;NK細胞功能缺陷動物:Beige小鼠;聯(lián)合免疫缺陷動物:SCID小鼠)、獲得性免疫缺陷動物(AIDS模型)
10、裸小鼠主要特征:(1)無毛、裸體、無胸腺;(2)隨著鼠齡增長,皮膚變薄,頭頸部皮膚皺褶,發(fā)育遲緩;(3)細胞免疫力低下;(4)無接觸敏感性,無移植排斥;(5)粒細胞數(shù)量比普通小鼠少;(6)成年裸鼠NK細胞活性高于普通小鼠,幼鼠低于普通小鼠;(7)B淋巴細胞數(shù)量正常但功能發(fā)揮有所限制;(8)抵抗力差,易患病毒性肝炎和肺炎;(9)純合型雌裸鼠受孕率低,乳腺發(fā)育不良;(10)實驗用裸鼠年齡選擇:4-8周齡
11、SCID小鼠的基本特征:(1)外觀與普通小鼠無異,體重發(fā)育正常,但胸腺、脾、淋巴結(jié)的重量一般均不及正常的30%,組織學(xué)上表現(xiàn)為淋巴細胞顯著缺乏;(2)胸腺沒有皮質(zhì)結(jié)構(gòu),僅殘存髓質(zhì);(3)脾小體無淋巴細胞聚集;(4)淋巴結(jié)無明顯皮質(zhì)區(qū),副皮質(zhì)區(qū)缺失,呈淋巴細胞空脫狀,由網(wǎng)狀細胞所占據(jù);(5)骨髓結(jié)構(gòu)正常,外周血白細胞較少;(6)T、B細胞大大減少,細胞和體液免疫功能均缺陷;(7)巨噬細胞、NK細胞、粒細胞、巨核細胞、LAK細胞功能均未受影響,呈正常狀態(tài)。
12、SCID-hu小鼠:由于SCID小鼠缺乏有效的免疫系統(tǒng),通過移植人免疫組織或免疫細胞,使SCID小鼠具有了人類部分免疫系統(tǒng),稱為SCID-hu小鼠。
第六章動物福利
1、動物福利:指人為地給動物提供適宜的物質(zhì)條件以保證動物在健康舒適的狀態(tài)下生存、生理和心理愉快的感受狀態(tài)。對象:實驗動物、野生動物、娛樂動物、經(jīng)濟動物等,不包括害蟲。
2、動物享受的五大自由:享有不受饑渴的自由;享有生活舒適的自由;享有無恐懼和悲傷的自由;享有不受痛苦、傷害和疾病折磨的自由;享有表達天性的自由。
3、3R原則及意義:優(yōu)化:使用新的有效的鎮(zhèn)痛劑、麻醉劑或改進實驗程序、優(yōu)化實驗操作,從而減少動物在實驗過程中的痛苦。
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減少:選用恰當(dāng)實驗動物進行規(guī)范化動物實驗、提高實驗動物利用率,以減少動物使用量。替代:應(yīng)用微生物或細胞、組織、器官,亦可用低等動物代替,甚至計算機模擬代替整體動物實驗。
“3R運動”的推進,將使實驗動物的使用量逐漸減少,動物實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性不斷提高。4、安死術(shù):即安樂死術(shù),是指以人道的方法處死動物過程。在處死動物的過程中盡量減少動物的驚慌、焦慮,使其安靜地、無痛苦地死亡。
第七章動物實驗設(shè)計
1、動物實驗設(shè)計應(yīng)遵循的原則:對照的原則、隨機化原則、重復(fù)的原則、一致性原則、彈性原則、最經(jīng)濟原則。
2、常用動物實驗設(shè)計方法:單組比較設(shè)計、配對比較設(shè)計、完全隨機設(shè)計、隨機區(qū)組設(shè)計、拉丁方設(shè)計、正交設(shè)計。
3、實驗動物選擇基本原則:
相似性原則:利用動物與人類某些機能、代謝、結(jié)構(gòu)及疾病特點的相似性選擇實驗動物。(豬-燒傷實驗;犬-藥理毒理學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、行為學(xué)、外科學(xué)研究;獼猴-避孕藥;家兔-避孕藥;齒式-豬;遺傳性高血壓大鼠、糖尿病小鼠、猴對痢疾桿菌敏感)
特殊性原則:是指利用不同種系實驗動物機體存在的特殊構(gòu)造或某些特殊反應(yīng)選擇解剖、生理特點符合實驗?zāi)康暮鸵蟮膭游。(大鼠無膽囊;家兔對體溫變化敏感;豚鼠不能合成維C;大鼠垂體腎上腺功能發(fā)達)
標(biāo)準(zhǔn)化原則:指選擇和使用與研究內(nèi)容相匹配的標(biāo)準(zhǔn)化的實驗動物。規(guī)格化原則:指選擇與實驗要求一致的動物規(guī)格。
經(jīng)濟性原則:指在不影響實驗質(zhì)量的前提下,盡量選用最易獲得、最經(jīng)濟、最易飼養(yǎng)管理的動物。
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