必修1生物實驗

必修1生物實驗

一、使用高倍鏡觀察幾種細(xì)胞P7顯微鏡的結(jié)構(gòu)、功能及使用方法按功能分，顯微鏡的結(jié)構(gòu)包括：1.放大系統(tǒng)：目鏡、物鏡。

2.照明系統(tǒng)：光源、反光鏡、光圈。

3.機械和支架系統(tǒng)：鏡座、鏡臂、傾斜關(guān)節(jié)、載物臺、壓片夾、物鏡轉(zhuǎn)換器、粗準(zhǔn)焦螺旋、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。物鏡

作用：放大物象

有螺紋,鏡頭上標(biāo)有放大倍數(shù)，有低倍鏡（短）和高倍鏡（長）之分目鏡

作用：無螺紋，其長度隨倍數(shù)的增加而變短，反比。反光鏡

作用：反射光線，有平面鏡（強光使用）和凹面鏡（弱光使用）兩種光圈

作用：調(diào)節(jié)通光量，有大小不同的光圈使用方法

1.安放：放在身體偏左側(cè)，距離桌子邊緣約10cm處。

2.對光：轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使低倍鏡對準(zhǔn)通光孔。調(diào)節(jié)反光鏡，使視野下光線適中。3.放片：將載玻片放在載物臺上，標(biāo)本對準(zhǔn)通光孔，用壓片夾固定載玻片。4.觀察

（1）先用低倍鏡觀察：從側(cè)面看顯微鏡，用粗準(zhǔn)焦螺旋將鏡筒降到最低，但不能碰到載玻片。通過目鏡觀察標(biāo)本的同時，用粗準(zhǔn)焦螺旋使鏡筒慢慢上升到能看到模糊物象為止，再用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋將視野調(diào)整清晰。即可觀察。

（2）再用高倍鏡觀察：先將物象移到視野中央，然后換高倍鏡，調(diào)整反光鏡使視野亮度適合，用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋將視野調(diào)節(jié)清晰。即可觀察。

（3）若一個視野下物象不全，可移動載玻片繼續(xù)尋找進行觀察。有關(guān)問題

1.在低倍鏡下找不到物象，不要換高倍鏡。換了高倍鏡后不準(zhǔn)使用粗準(zhǔn)焦螺旋。2.自制切片由于切片薄厚不均勻，會出現(xiàn)有的部分清晰，有的部分不清晰的現(xiàn)象。3.物鏡鏡頭長度與放大倍數(shù)成正比，目鏡鏡頭長度與放大倍數(shù)成反比。

4.低倍鏡下：物象小，視野亮，細(xì)胞數(shù)多；高倍鏡下：物象大，視野暗，細(xì)胞數(shù)少

（1）目鏡：轉(zhuǎn)動目鏡，跟著動，在目鏡上。（2）裝片：串動裝片，跟著動，在裝片上

（3）物鏡：換物鏡，污染物不見了，在物鏡上。6.物象在右側(cè)，要移到中央，仍向右側(cè)移動。

7.視野下的物象旋轉(zhuǎn)180℃后為正常狀態(tài)的物象。裝片制作時的注意事項

1.防止氣泡的產(chǎn)生：讓蓋玻片一側(cè)先接觸水滴，然后輕輕蓋上。

2.制作裝片時，如果實驗材料是動物細(xì)胞，則在載玻片的中央滴生理鹽水，維持細(xì)胞的正常形態(tài)。如果實驗材料是植物細(xì)胞，則在載玻片的中央滴清水即可，因為植物細(xì)胞有細(xì)胞壁不會過度吸水。二、檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)P18實驗部分

實驗原理：某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。材料要求：顯色反應(yīng)要盡量用白色或接近白色的實驗材料，顏色變化觀察的清楚。一.生物組織中還原糖的檢測1.試劑：斐林試劑

使用前等量混合均勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。2.檢測和觀察

（1）向試管內(nèi)注入2mLd的待測組織樣液。（2）向試管內(nèi)注入1mL混合好的斐林試劑。

（3）將試管放入盛有50~65℃溫水的大燒杯中隔水加熱約2min。（4）觀察顏色變化：淺藍(lán)色→棕色→磚紅色3.分析實驗結(jié)果

試管中出現(xiàn)磚紅色，證明該試管中是還原糖。

還原糖：單糖（葡萄糖、果糖、半乳糖、核糖和脫氧核糖）、二糖中的麥芽糖和乳糖。二.生物組織中脂肪的檢測

1.試劑：蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、酒精。2.檢測和觀察

方法一：直接向待測組織樣液中滴加3滴蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液，觀察樣液染色的情況。方法二：制作子葉臨時切片，用顯微鏡觀察子葉細(xì)胞的著色情況（以花生為例）。（1）取材：取一粒浸泡過的花生種子，去掉種皮。

（2）切片：用刀片在花生子葉的橫斷面上平行切下若干薄片，放入盛有清水的培養(yǎng)皿中待用。

（3）制片：①從培養(yǎng)皿中選取最薄的切片，用毛筆蘸取放在載玻片中央

②在花生子葉薄片上滴2~3滴蘇丹Ⅲ染液，染色3min（如果用蘇丹Ⅳ染液，染色1min）③用吸水紙吸去染液，再滴加1~2滴體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液，洗去浮色

④用吸水紙吸去花生子葉周圍的酒精，滴一滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片。（4）觀察：先用低倍鏡，找到物象，移到視野中央，換高倍鏡，調(diào)整清晰。3.實驗結(jié)果：在視野中可見被染成橘黃色的脂肪顆粒（或紅色的脂肪顆粒）。三.生物組織中蛋白質(zhì)的鑒定1.試劑：雙縮脲試劑。2.檢測和觀察

（1）向試管內(nèi)注入待測組織樣液2mL

（2）向試管內(nèi)注入雙縮脲試劑A液1mL，搖勻（3）向試管內(nèi)注入雙縮脲試劑B液4滴，搖勻（4）觀察試管中出現(xiàn)的顏色變化

3.實驗結(jié)果：如果出現(xiàn)紫色反應(yīng)，證明試管內(nèi)為蛋白質(zhì)。6.斐林試劑與雙縮脲試劑的區(qū)別（1）濃度不同

（2）使用原理不同：

斐林：是新配制的Cu（OH）2溶液。

雙縮脲：在堿性環(huán)境中CuSO4與具有肽鍵結(jié)構(gòu)的物質(zhì)反應(yīng)。（3）使用方法不同：斐林：將CuSO4和NaOH等量混合形成斐林試劑后，加入到還原糖中。雙縮脲：在蛋白質(zhì)溶液中先加NaOH2mL，后加4滴CuSO4。

注意：雙縮脲試劑不能由來鑒定氨基酸。因為氨基酸中沒有肽鍵。四.生物組織中淀粉的鑒定1.試劑：碘液。2.檢測和觀察

（1）向試管內(nèi)注入2mL待測組織樣液。

（2）向試管內(nèi)滴加2滴碘液，觀察顏色變化。3.實驗結(jié)果：試管內(nèi)出現(xiàn)藍(lán)色，證明其中是淀粉。

總結(jié)：三大類物質(zhì)的鑒定步驟都是：取樣→顏色反應(yīng)→觀察鑒定可溶性還原糖鑒定要水浴加熱才能出現(xiàn)顏色反應(yīng)

脂肪鑒定染色后要洗去浮色，再制片用顯微鏡觀察（先低后高

蛋白質(zhì)鑒定要先加雙縮脲試劑A液（質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液），后加B液（質(zhì)量濃度為0.01g/ml的CuSO4溶液

三、觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布P26染色劑染色顏色主要存在部位DNA甲基綠綠色主要在細(xì)胞核RNA吡羅紅紅色主要在細(xì)胞質(zhì)方法步驟

1.取口腔上皮細(xì)胞或洋蔥表皮細(xì)胞口腔上皮細(xì)胞：在載玻片上滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCI溶液；用牙簽在漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕地刮幾下，把牙簽放在載玻片的滴液中涂抹幾下；然后將載玻片在酒精燈上烘干。洋蔥表皮細(xì)胞：在載玻片上滴一滴清水，用鑷子撕一小片白色的洋蔥表皮細(xì)胞，平鋪在清水中；然后將載玻片在酒精燈上烘干。2.水解

（1）在小燒杯中加入30mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸，將烘干的載玻片放入小燒杯中。作用：改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進入細(xì)胞，同時使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑的結(jié)合。（2）在大燒杯中加入30℃溫水。

（3）將盛有鹽酸和載玻片的小燒杯放在大燒杯中保溫5min.3.沖洗涂片

用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10s。4.染色

（1）用吸水紙吸去載玻片上的水分。（2）將吡羅紅甲基綠染色劑滴2滴在載玻片上,染色5min（3）吸去多余的染色劑,蓋上蓋玻片。5.觀察：先用低倍鏡，后用高倍鏡。

6.現(xiàn)象：細(xì)胞核被染成綠色，細(xì)胞質(zhì)被染成紅色。

7.結(jié)論DNA主要分布在細(xì)胞核中，RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。四、體驗制備細(xì)胞膜的方法P40

1.實驗材料：哺乳動物的成熟的紅細(xì)胞2.原料:哺乳動物成熟的紅細(xì)胞無核，也無其他的細(xì)胞器。用它做實驗材料所制備的細(xì)胞膜純凈。

3.方法步驟：

（1）用滴管吸取少量的紅細(xì)胞稀釋液，制成臨時裝片。

（2）高倍鏡下觀察清晰時，在蓋玻片的一側(cè)滴一滴蒸餾水，另一側(cè)用吸水紙吸。持續(xù)觀察細(xì)胞的變化。可見近水部分的紅細(xì)胞凹陷消失，體積變大，很快細(xì)胞破裂，內(nèi)容物流出。4.應(yīng)用（1）研究細(xì)胞膜的成分及水分進出細(xì)胞的方式

（2）用于血紅蛋白的提取。五、觀察線粒體和葉綠體P47

該實驗要用活細(xì)胞，因為細(xì)胞死后細(xì)胞器會被溶酶體溶解，就無法觀察了。1.實驗原理

（1）高等綠色植物的葉綠體存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，葉綠體一般是綠色的，扁平的橢球形或球形，可以用高倍顯微鏡觀察它的形態(tài)和分布

（2）健那綠染液是專一性染線粒體的活細(xì)胞染料�？梢允够罴�(xì)胞的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色2.方法步驟與注意事項（1）觀察葉綠體裝片

①取材：取一片蘚類小葉或波菜葉稍帶葉肉的下表皮（薄且有葉綠體，下表皮葉綠體少且體積大）

②制片：載玻片中央滴一滴清水，將葉片放入，加上蓋玻片，制成臨時裝片（裝片要隨時保持有水狀態(tài)）

③觀察：先低倍鏡找到葉片細(xì)胞后，換高倍鏡觀察葉綠體（形態(tài)和分布）[光強度的變化與葉綠體的位置關(guān)系

由于葉綠體含有色素，所以不用染色就可以看得見（2）觀察線粒體

①取材：人的口腔上皮細(xì)胞或白皮洋蔥表皮細(xì)胞（淺色的實驗材料）。

②染色與制片：在載玻片上滴一滴健那綠染液（此染液是用生理鹽水配制），將牙簽上口腔上皮細(xì)胞放在染液中涂抹幾下，蓋上蓋玻片。

③觀察：先用低倍鏡，找到物象，移到視野中央，換用高倍鏡，可見藍(lán)綠色的線粒體

六、通過模擬實驗探究膜的透性植物細(xì)胞的吸水和失水P61

植物細(xì)胞的吸水和失水的實驗要用活細(xì)胞1.水分滲透作用示意圖

滲透作用：水分子從濃集區(qū)域通過膜，向水分子稀少區(qū)域的擴散現(xiàn)象叫滲透作用。滲透作用的條件：（1）膜結(jié)構(gòu)（2）膜的兩側(cè)具有濃度差2.植物細(xì)胞的吸水和失水的原理

成熟的植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)具有中央大液泡）、細(xì)胞核。液泡的結(jié)構(gòu)：細(xì)胞液和液泡膜。原生質(zhì)層：細(xì)胞膜和液泡膜以及兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì)稱為原生質(zhì)層。植物的原生質(zhì)層相當(dāng)于一層半透膜。3.觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原

（1）制作洋蔥鱗片葉外表皮的臨時裝片。

（2）觀察正常細(xì)胞：用低倍鏡觀察洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞中紫色的中央液泡的大小，以及原生質(zhì)層的位置

（3）觀察質(zhì)壁分離的細(xì)胞：從蓋玻片的一側(cè)滴入0.3g/mL的蔗糖溶液，另一側(cè)用吸水紙吸引，重復(fù)幾次，用低倍鏡觀察。（4）觀察質(zhì)壁分離復(fù)原的細(xì)胞：從蓋玻片的一側(cè)滴入清水，另一側(cè)用吸水紙吸引，重復(fù)幾次，用低倍鏡觀察。4.植物細(xì)胞的吸水和失水①失水：當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進入外界溶液中，細(xì)胞失水，出現(xiàn)質(zhì)壁分離現(xiàn)象。質(zhì)壁分離：原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離的現(xiàn)象。

出現(xiàn)質(zhì)壁分離的原因：內(nèi)因：細(xì)胞壁與原生質(zhì)層的伸縮性不同。

外因：細(xì)胞內(nèi)外具有濃度差。

②吸水：當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，外界溶液中的水分就會透過原生質(zhì)層進入細(xì)胞中，整個原生質(zhì)層就會慢慢恢復(fù)原來的狀態(tài)，使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離的復(fù)原。滲透作用：水分子從水分子個數(shù)多的一側(cè)通過膜向水分子個數(shù)少的一側(cè)擴散的現(xiàn)象。植物細(xì)胞有細(xì)胞壁的保護，一般不會出現(xiàn)過度吸水破裂的現(xiàn)象。

注意：將洋蔥表皮細(xì)胞放在0.3g/mL的蔗糖溶液中，發(fā)生質(zhì)壁分離后，再滴入清水，可以發(fā)生質(zhì)壁分離的復(fù)原

如果將洋蔥表皮細(xì)胞放在0.5g/mL的蔗糖溶液中，發(fā)生質(zhì)壁分離后，再滴入清水，不會發(fā)生質(zhì)壁分離的復(fù)原，因為細(xì)胞過度失水而導(dǎo)致死亡。放在一定濃度的酒精、NaCl、KNO3、葡萄糖等溶液中的細(xì)胞，先發(fā)生質(zhì)壁分離，然后會發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原現(xiàn)象。

原因：以上小分子物質(zhì)可以以各種方式進入細(xì)胞中，使細(xì)胞液濃度升高，高于外界溶液濃度時，細(xì)胞吸水，出現(xiàn)質(zhì)壁分離的自動復(fù)原現(xiàn)象。注意：如果以上物質(zhì)的濃度過高，會使細(xì)胞在短時間內(nèi)失水過多而導(dǎo)致死亡，則不能出現(xiàn)自動復(fù)原的現(xiàn)象。此外：細(xì)胞不能放在過酸或過堿的環(huán)境中，會導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，而引起細(xì)胞死亡。2.滲透作用的應(yīng)用

（1）判斷細(xì)胞的死活和種類：只有具有大液泡的活的植物細(xì)胞才能發(fā)生質(zhì)壁分離及復(fù)原。不能發(fā)生質(zhì)壁分離的細(xì)胞：動物細(xì)胞、死細(xì)胞、無大液泡的植物細(xì)胞（如：干種子、分生區(qū)的細(xì)胞、形成層的細(xì)胞）

（2）判定細(xì)胞質(zhì)（或細(xì)胞液）的濃度：根據(jù)細(xì)胞體積的變化做出判斷（外界溶液的濃度是已知的）。

（3）觀察植物細(xì)胞的細(xì)胞膜：正常情況下細(xì)胞膜和細(xì)胞壁是緊緊貼在一起的，不易觀察，在發(fā)生質(zhì)壁分離的時候，可以觀察到細(xì)胞膜。3.細(xì)胞吸水和失水原理的應(yīng)用

（1）對農(nóng)作物的合理灌溉，既滿足了作物對水分的需要同時又降低了土壤溶液的濃度，有利于水分的吸收。（2）鹽堿地中的植物不易存活或一次施肥過多造成燒苗現(xiàn)象，都是因為土壤溶液濃度過高，甚至超過了根細(xì)胞液濃度，導(dǎo)致根細(xì)胞不易吸水甚至失水造成的。

（3）糖漬、鹽漬食品不易變質(zhì)的原因，是在食品外面和內(nèi)部形成很高濃度的溶液，使微生物不能在其中生存和繁殖，所以能較長時間保存。

（4）醫(yī)用的生理鹽水濃度為0.9%，其滲透壓與人體細(xì)胞外液滲透壓相等，可以使人體細(xì)胞保持正常的形態(tài)和功能。七、探究酶的特性P78

八、探究影響酶活性的條件P83

九、探究酵母菌的呼吸方式P91（此實驗要用活細(xì)胞）一、實驗原理

1、酵母菌是單細(xì)胞真菌屬于兼性厭氧菌。進行有氧呼吸產(chǎn)生水和CO2，無氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2。

2、CO2的檢測方法

（1）CO2使澄清石灰水變渾濁

（2）CO2使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃3、酒精的檢測

橙色的重酪酸鉀溶液在酸性下與酒精發(fā)生反應(yīng)，變成灰綠色。二、實驗假設(shè)

酵母菌在有氧情況下進行有氧呼吸，產(chǎn)生CO2，在無氧情況下進行無氧呼吸，產(chǎn)生CO2和酒精

三.實驗裝置

質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的NaOH溶液的作用：吸收空氣中的CO2。四.實驗結(jié)果預(yù)測

1、酵母菌在有氧和無氧情況下均產(chǎn)生了CO2，能使澄清的石灰水變渾濁，或使溴色香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。但石灰水的混濁程度不同或溴色香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃的時間長短不同。

2、酵母菌在有氧情況下，沒有酒精生成，不能使重鉻酸鉀溶液發(fā)生顯色反應(yīng)；在無氧情況下，生成了酒精，使橙色的重鉻酸鉀溶液變成灰綠色。3、酵母菌的有氧呼吸比無氧呼吸釋放的CO2要多。十、葉綠體色素的提取和分離P971提取方法：溶解、過濾；

原理：綠葉中的色素是酯質(zhì)，不溶于水，易溶于丙酮等有機溶劑中，所以用丙酮、乙醇等有機溶劑能提取色素。

2分離方法：紙層析法。

原理：色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高隨層析液在濾紙上擴散得快，溶解度低隨層析液在濾紙上擴散得慢。1.提取色素

二氧化硅：研磨的充分，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，使色素釋放出來。碳酸鈣：防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。無水乙醇：有機溶劑，提取葉綠體中的色素。2.制備濾紙條3.畫濾液細(xì)線4.色素的分離：

胡蘿卜素：橙黃色；葉黃素：黃色；葉綠素a：藍(lán)綠色；葉綠素b：黃綠色

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實驗一檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)（必修一P18）

一．實驗?zāi)康模簢L試用化學(xué)試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)

二．實驗原理：某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。

1．可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發(fā)生作用，可生成磚紅色的Cu2O沉淀。如：加熱葡萄糖+Cu(OH)2葡萄糖酸+Cu2O↓（磚紅色）+H2O，即Cu(OH)2被還原成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

2．脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色）。淀粉遇碘變藍(lán)色。3．蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。（蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵，在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。）三．實驗材料

1．做可溶性還原性糖鑒定實驗，應(yīng)選含糖高，顏色為白色的植物組織，如蘋果、梨。（因為組織的顏色較淺，易于觀察。）2．做脂肪的鑒定實驗。應(yīng)選富含脂肪的種子，以花生種子為最好，實驗前一般要浸泡3~4小時（也可用蓖麻種子）。3．做蛋白質(zhì)的鑒定實驗，可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。四、實驗試劑

斐林試劑（包括甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/mLNaOH溶液和乙液：質(zhì)量濃度為0.05g/mLCuSO4溶液）、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑（包括A液：質(zhì)量濃度為0.1g/mLNaOH溶液和B液：質(zhì)量濃度為0.01g/mLCuSO4溶液）、體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液，碘液、蒸餾水。五、方法步驟：

（一）可溶性糖的鑒定

操作方法注意問題解釋1.制備組織樣液。蘋果或梨組織液必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高，（去皮、切塊、研磨、過濾）組織液很易被氧化成褐色，將產(chǎn)生的顏色掩蓋。2.取1支試管，向試管內(nèi)注入2mL組織樣液。3.向試管內(nèi)注入1mL新制的斐林試劑，振蕩。應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存，使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑；切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。最好用試管夾夾住試管上部，使試管底部不觸及燒杯底部，試管口不朝向?qū)嶒炚�。也可用酒精燈對試管直接加熱。斐林試劑很不穩(wěn)定，甲、乙液混合保存時，生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發(fā)生反應(yīng)，無Cu(OH)2生成。防止試管內(nèi)的溶液沖出試管，造成燙傷；縮短實驗時間。4.試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中，加熱約2分鐘，觀察到溶液顏色：淺藍(lán)色→棕色→磚紅色（沉淀）（二）脂肪的鑒定操作方法花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片，將薄片放在載玻片的水滴中，用吸水紙吸去裝片中的水。在子葉薄片上滴2~3滴蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液，染色1分鐘。用吸水紙吸去薄片周圍染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。注意問題干種子要浸泡3~4小時，新花生的浸泡時間可縮短。染色時間不宜過長。解釋因為浸泡時間短，不易切片，浸泡時間過長，組織較軟，切下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些，便于觀察。酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時，酒精是脂溶性溶劑，可將花生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。滴上清水可防止蓋蓋玻片時產(chǎn)生氣泡。時間一長，油滴會溶解在乙醇中。用吸水紙吸去薄片周圍酒精，滴上1~2滴蒸餾水，蓋上蓋玻片。低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處，可看到細(xì)胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒。

三、蛋白質(zhì)的鑒定操作方法裝片不宜久放。注意問題解釋黃豆浸泡1至2天，容易研磨成漿，也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約實驗時間。先加NaOH溶液，為Cu2+與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時加入，會導(dǎo)致Cu2+變成Cu(OH)2沉淀，而失效。否則CuSO4的藍(lán)色會遮蓋反應(yīng)的真實顏色。如果稀釋不夠，在實驗中蛋清粘在試管壁，與雙縮脲試劑反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上，使反應(yīng)不容易徹底，并且試管也不易洗干凈。以免影響顏色觀察制備組織樣液。（浸泡、去皮研磨、過濾。）鑒定。加樣液約2ml于試管中，加入雙縮脲試劑A，搖勻；再加入雙縮脲試劑B液3~4滴，搖勻，溶液變紫色。A液和B液也要分開配制，儲存。鑒定時先加A液后加B液。CuSO4溶液不能多加。蛋清要先稀釋�？捎玫扒宕�替豆?jié){。附：淀粉的檢測和觀察碘液不要滴太多用試管取2ml待測組織樣液，向試管內(nèi)滴加2滴碘液，觀察顏色變化。

*可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發(fā)生作用，可生成磚紅色的Cu2O沉淀。如：

葡萄糖+2Cu+4OH加熱葡萄糖酸+Cu2O↓（磚紅色）+H2O

即Cu被還原成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

*蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。（蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵，在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試

2+

劑中的Cu作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。）

2+2+

實驗三用顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞（必修一P7）

一．實驗?zāi)康模?/p>

1）使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞，比較不同細(xì)胞的異同點2）運用制作臨時裝片的方法二．實驗原理：

利用高倍鏡可以看到某些在低倍鏡下無法看到的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，例如：可以看到葉綠體、線粒體等細(xì)胞器，從而能夠區(qū)別不同的細(xì)胞。三．方法步驟：

第一步：轉(zhuǎn)動反光鏡使視野明亮

第二步：在低倍鏡下觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野中央第三步：用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過高倍物鏡

問（1）是低倍鏡還是高倍鏡的視野大，視野明亮？為什么？

提示：低倍鏡的視野大，通過的光多，放大的倍數(shù)��；高倍鏡視野小，通過的光少，但放大的倍數(shù)高。問（2）為什么要先用低倍鏡觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察？

提示：如果直接用高倍鏡觀察，往往由于觀察的對象不在視野范圍內(nèi)而找不到。因此，需要先用低倍鏡觀察清楚，并把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察。問（3）用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過高倍鏡后，轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋行不行？

提示：不行。用高倍鏡觀察，只需微調(diào)即可。轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，容易壓壞玻片。第四步：觀察并用細(xì)胞準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦。四：討論：

1.使用高倍鏡觀察的步驟和要點是什么？答：（1）首先用低倍鏡觀察，找到要觀察的物像，移到視野的中央。

（2）轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，用高倍鏡觀察，并輕輕轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，直到看清楚材料為止。

2.試歸納所觀察到的細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上的共同點，并描述它們之間的差異，分析產(chǎn)生差異的可能的原因：答：這些細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上的共同點是：有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，植物細(xì)胞還有細(xì)胞壁。

各種細(xì)胞之間的差異和產(chǎn)生差異的可能原因是：這些細(xì)胞的位置和功能不同，其結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)，這是個體發(fā)育過程中細(xì)胞分化產(chǎn)生的差異。

3.P8圖是一個大腸桿菌的電鏡照片和結(jié)構(gòu)模式圖，大腸桿菌與你在本實驗中觀察到的細(xì)胞有什么主要區(qū)別？答：從模式圖中可以看出，大腸桿菌沒有明顯的細(xì)胞核，沒有核膜，細(xì)胞外有鞭毛，等等。

注：換高倍物鏡時只能移動轉(zhuǎn)換器，換鏡后，只準(zhǔn)調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦和反光鏡（或光圈）。問1：低倍鏡換為高倍鏡后，若看不到或看不清原來的像，可能原因？（ABC）

A、物像不在視野中B、焦距不在同一平面C、載玻片放反，蓋玻片在下面D、未換目鏡問2：放大倍數(shù)與視野的關(guān)系：

放大倍數(shù)越小，視野范圍越大，看到的細(xì)胞數(shù)目越多，視野越亮，工作距離越長；放大倍數(shù)越大，視野范圍越小，看到的細(xì)胞數(shù)目越少，視野越暗，工作距離越短。故裝片不能反放。

5．裝片的制作和移動：制作：滴清水→放材料→蓋片移動：物像在何方，就將載玻片向何處移。（原因：物像移動的方向和實際移動玻片的方向相反）6．污點判斷：1）污點隨載玻片的移動而移動，則位于載玻片上；

2）污點不隨載玻片移動，換目鏡后消失，則位于目鏡；換物鏡后消失，則位于物鏡；3）污點不隨載玻片移動，換鏡后也不消失，則位于反光鏡上。

7．完畢工作。使用完畢后，取下裝片，轉(zhuǎn)動鏡頭轉(zhuǎn)換器，逆時針旋出物鏡，旋進鏡頭盒；取出目鏡，插進鏡頭盒，蓋上。把顯微鏡放正。

實驗二：觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布（必修一P26）

一．實驗?zāi)康模撼醪秸莆沼^察DNA和RNA在細(xì)胞中分布的方法二．實驗原理：

1．甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。

2．鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進入細(xì)胞，同時使染色休中的DNA和蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑結(jié)合。三．方法步驟：操作步驟取口腔上皮細(xì)胞制片注意問題載玻片要潔凈，滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕刮幾下取細(xì)胞將載玻片在酒精燈下烘干解釋防止污跡干擾觀察效果保持細(xì)胞原有形態(tài)消毒為防止感染，漱口避免取材失敗固定裝片水解將烘干的載玻片放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進的鹽酸溶液中，用300C水浴保溫5min入細(xì)胞，促進染色體的DNA與蛋白質(zhì)分離而被染色用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10S洗去殘留在外的鹽酸滴2滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色5min先低倍鏡觀察，選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域，移至視野中央，調(diào)節(jié)清晰后才換用高倍物鏡觀察使觀察效果最佳沖冼涂片染色觀察四.結(jié)論

實驗四用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體（必修一P47）

一．實驗?zāi)康模?/p>

使用高倍鏡觀察葉綠體和線粒體的形態(tài)分布。二．實驗原理：

葉綠體的辨認(rèn)依據(jù)：葉綠體是綠色的，呈扁平的橢圓球形或球形。

線粒體辨認(rèn)依據(jù)：線粒體的形態(tài)多樣，有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。健那綠染液是專一性染線粒體的活細(xì)胞染料，可以使活細(xì)胞中線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色。三．實驗材料：

觀察葉綠體時選用：蘚類的葉、黑藻的葉。取這些材料的原因是：葉子薄而小，葉綠體清楚，可取整個小葉直接制片，所以作為實驗的首選材料。

若用菠菜葉作實驗材料，要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因為表皮細(xì)胞不含葉綠體。四．方法步驟：步驟1．制片。用鑷子取一片黑藻的小葉，放入載玻片的水滴中，蓋上蓋玻片。2．低倍鏡下找到葉片細(xì)胞3．高倍鏡下觀察葉綠體的形態(tài)和分布4．制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時裝片5．觀察線粒體注意問題制片和鏡檢時，臨時裝片中的葉片不能放干了，要隨時保持有水狀態(tài)在潔凈載玻片中央滴一滴健那綠染液→用牙簽取碎屑→蓋蓋玻片藍(lán)綠色的是線粒體，細(xì)胞質(zhì)接近無色。分析否則細(xì)胞或葉綠體失水收縮，將影響對葉綠體形態(tài)和分布的觀察。討論：

1、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體，是不是靜止不動的？為什么？

答：不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運動，這種運動能隨時改變橢球體的方向，使葉綠體既能接受較多光照，又不至于被強光灼傷。

2、葉綠體的形態(tài)和分布，與葉綠體的功能有什么關(guān)系？

答：葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細(xì)胞中的葉綠體比下面的多，這可以接受更多的光照。3.活細(xì)胞內(nèi)，線粒體的分布總是均勻的嗎？

實驗六觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原（必修一P61“探究”）

一、實驗?zāi)康模?/p>

1．學(xué)會觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離與復(fù)原的方法。2．了解植物細(xì)胞發(fā)生滲透作用的原理。二．實驗原理：

1．質(zhì)壁分離的原理：當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細(xì)胞就會通過滲透作用而失水，細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進入到溶液中，使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大，當(dāng)細(xì)胞不斷失水時，原生質(zhì)層就會與細(xì)胞壁分離。

2．質(zhì)壁分離復(fù)原的原理：當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，細(xì)胞就會通過滲透作用而吸水，外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進入到細(xì)胞液中，整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài)，緊貼細(xì)胞壁，使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。二、實驗材料：

紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色，易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質(zhì)壁分離劑對細(xì)胞無毒害作用。三、實驗步驟：步驟1．制作洋蔥表皮的臨時裝片。在載玻片上滴一滴水，撕取洋蔥鱗片葉外表皮放在水滴中展平（也可挑取幾條水綿放入水滴中）。蓋上蓋玻片。注意問題蓋蓋玻片應(yīng)讓蓋玻片的一側(cè)先觸及載玻片，然后輕輕放平。分析防止裝片產(chǎn)生氣泡。2．觀察洋蔥（或水綿）細(xì)胞可看到：液泡大，呈紫色，原生質(zhì)層緊貼著細(xì)胞壁。（或水綿細(xì)胞中有帶狀葉綠體，原生質(zhì)層呈綠色，緊貼著細(xì)胞壁。3．觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象。從蓋玻片的一側(cè)滴入0．3g/ml的蔗糖溶液，在另一側(cè)用吸水紙吸引，重復(fù)幾次。鏡檢。觀察到：液泡由大變小，顏色由淺變深，原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離。原生質(zhì)層與細(xì)胞壁之間充滿蔗糖溶液。4．觀察細(xì)胞質(zhì)壁分離的復(fù)原現(xiàn)象。從蓋玻片的一側(cè)滴入清水，在另一側(cè)用吸水紙吸引，重復(fù)幾次。鏡檢。觀察到：液泡由小變大，顏色由深變淺，原生質(zhì)層恢復(fù)原狀。重復(fù)幾次糖液濃度不能過高發(fā)生質(zhì)壁分離的裝片，不能久置，要馬上滴加清水，使其復(fù)原。重復(fù)幾次。液泡含花青素，所以液泡呈紫色。先觀察正常細(xì)胞與后面的“質(zhì)壁分離”起對照作用。蔗糖溶液濃度大于細(xì)胞液濃度，細(xì)胞通過滲透作用失水，細(xì)胞壁伸縮性小原生質(zhì)層的伸縮性大，液泡和原生質(zhì)層不斷收縮，所以發(fā)生質(zhì)壁分離。為了使細(xì)胞完全浸入蔗糖溶液中。否則，細(xì)胞嚴(yán)重失水死亡，看不到質(zhì)壁分離的復(fù)原。細(xì)胞液的濃度高于外界溶液，細(xì)胞通過滲透作用吸水，所以發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原現(xiàn)象。因為細(xì)胞失水過久，也會死亡。為了使細(xì)胞完全浸入清水中。實驗討論答案：

1．如果將上述表皮細(xì)胞浸潤在與細(xì)胞液濃度相同的蔗糖溶液中，這些表皮細(xì)胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？答：表皮細(xì)胞維持原狀，因為細(xì)胞液的濃度與外界溶液濃度相等。

2．當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時，紅細(xì)胞會不會發(fā)生質(zhì)壁分離？為什么？答：不會。因為紅細(xì)胞不具細(xì)胞壁。

實驗七探究影響酶活性的因素（必修一

P78、P83）

一．實驗?zāi)康模?/p>

1．探究不同溫度和PH對過氧化氫酶活性的影響。2．培養(yǎng)實驗設(shè)計能力。二．方法步驟：

提出問題→作出假設(shè)→設(shè)計實驗→（包括選擇實驗材料、選擇實驗器具、確定實驗步驟、設(shè)計實驗記錄表格）→實施實驗→分析與結(jié)論→表達(dá)與交流。

實例1：比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率一）．實驗原理：

鮮肝提取液中含有過氧化氫酶，過氧化氫酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。經(jīng)計算，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的FeCl3溶液和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的肝臟研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+數(shù)，大約是每滴肝臟研磨液中過氧化氫酶分子數(shù)的25萬倍。二）方法步驟：步驟取4支潔凈試管，編號，分別加入2mLH2O2溶液將2號試管放在900C左右的水浴中加熱，觀察氣泡冒出情況，與1號對照向3號、4號試管內(nèi)分別滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝臟研磨液，觀察氣泡產(chǎn)生情況注意問題不讓H2O2接觸皮膚解釋H2O2有一定的腐蝕性不可用同一支滴管肝臟研磨液必須是新鮮的肝臟在制成研磨液放衛(wèi)生香時，動作要快，不要插到氣泡中由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過氧化氫酶，會影響實驗準(zhǔn)確性因為過氧化氫酶是蛋白質(zhì)，放置過久，可受細(xì)菌作用而分解，使肝臟組織中酶分子數(shù)減少，活性降低研磨可破壞肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞內(nèi)的酶釋放出來，增加酶與底物的接觸面積現(xiàn)象：3號試管產(chǎn)生氣泡多，冒泡時間短，衛(wèi)生香猛烈復(fù)燃，4號試管產(chǎn)生氣泡少，冒泡時間長，衛(wèi)生香幾乎無變化避免衛(wèi)生香因潮濕而熄滅2-3min后，將點燃的衛(wèi)生香分別放入3號和4號試管內(nèi)液面的上方，觀察復(fù)燃情況

實例2：溫度對酶活性的影響一）實驗?zāi)康模?/p>

1．初步學(xué)會探索溫度對酶活性的影響的方法。2．探索淀粉酶在不同溫度下催化淀粉水解的情況。二）實驗原理：

1．淀粉遇碘后，形成紫藍(lán)色的復(fù)合物。

2．淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖（淀粉水解過程中，不同階段的中間產(chǎn)物遇碘后，會呈現(xiàn)紅褐色或紅棕色。）麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色。注：市售a-淀粉酶的最適溫度約600C三）方法步驟：

操作取3支試管，編上號，然后分別注入2mL可溶性淀粉溶液注意問題解釋防止混合時，由于兩種溶液的溫度不同而使混合后溫度發(fā)生變化，反應(yīng)溫度不是操作者所要控制的溫度，影響實驗結(jié)果。淀粉酶催化淀粉水解需要一定時間另取3支試管，編上號，然后分別注入1mL新鮮淀粉酶溶液將裝有淀粉溶液和酶溶液的試管分成3組，分別放入熱水（約600C）、沸水和冰塊中，維持各自的溫度5min分別將淀粉酶溶液注入相同溫度下的淀粉溶液中，搖勻后，維持各自的溫度5min在3支試管中各滴入1-2滴碘液，搖勻后觀察這3支試管中溶液顏色變化并記錄用表格的形式顯示實驗步驟不能只用不同溫度處理淀粉溶液或酶溶液保持各自溫度時間不能太短碘液不能滴加太多防止影響實驗現(xiàn)象的觀察序號123加入試劑或處理方法可溶性淀粉溶液新鮮淀粉酶溶液保溫5min將a液加入到A試管，b液加入到B試管，c液加入到C試管中，搖勻保溫5min滴入碘液，搖勻觀察現(xiàn)象并記錄試管A2mL/B2mL/C2mL/a/1mLb/1mLc/1mL600C1000C00C600C1000C00C456600C1000C00C2滴2滴2滴

實例3：PH值對酶活性的影響

操作步驟：用表格開式顯示實驗步驟：（注意操作順序不能錯）

序號123456789加入試劑或處理方法注入新鮮的淀粉酶溶液注入蒸餾水注入氫氧化鈉溶液注入鹽酸注入可溶性淀粉溶液600C水浴保溫5min加入斐林試劑，邊加邊振蕩水浴加熱煮沸1min觀察3支試管中溶液顏色變化變記錄試管11mL1mL//2mL2mL2mL2mL21mL/1mL/2mL31mL//1mL2mL4.討論：為什么操作順序不能調(diào)換實驗九探究酵母菌的呼吸方式（必修一P91）

一．實驗?zāi)康模?/p>

1．了解酵母菌的無氧呼吸和有氧呼吸情況2．學(xué)會運用對比實驗的方法設(shè)計實驗二．實驗原理：

1．酵母菌是一種單細(xì)胞真菌，在有氧和無氧的條件下都能生存，屬于兼性厭氧菌，因此便于用來研究細(xì)胞呼吸的不同方式。方程式（略）

2．CO2可使澄清石灰水變混濁，也可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍(lán)水溶液變成黃色的時間長短，可以檢測酵母菌培養(yǎng)CO2的產(chǎn)生情況。

3．橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇（酒精）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，在酸性條件下，變成灰綠色。三．方法步驟：

提出問題→作出假設(shè)→設(shè)計實驗→（包括選擇實驗材料、選擇實驗器具、確定實驗步驟、設(shè)計實驗記錄表格）→實施實驗→分析與結(jié)論→表達(dá)與交流。1．酵母菌培養(yǎng)液的配制

取20g新鮮的食用酵母菌，分成兩等份，分別放入錐形瓶A（500mL）和錐形瓶B（500mL）中，再分別向瓶中注入240mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的葡萄糖溶液2．檢測CO2的產(chǎn)生

用錐形瓶和其他材料用具組裝好實驗裝置（如圖），并連通橡皮球（或氣泵），讓空氣間斷而持續(xù)地依次通過3個錐形瓶（約50min）。然后將實驗裝置放到25-350C的環(huán)境中培養(yǎng)8-10h。

3．檢測灑精的產(chǎn)生

各取2mL酵母菌培養(yǎng)液的濾液，分別注入2支干凈的試管中。向試管中分別滴加0.5mL溶有0.1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（體積分?jǐn)?shù)為95%-97%）并輕輕振蕩，使它們混合均勻，觀察試管中溶液的顏色變化。

實驗八葉綠體色素的提取和分離（必修一P97）

一．實驗?zāi)康模?/p>

1．嘗試用過濾方法提取葉綠體中的色素和用紙層析法分離提取到的色素。2．分析實驗結(jié)果，探究葉綠體中有幾種色素，以及各自所呈現(xiàn)的顏色。二．實驗原理：

1．葉綠體中的色素是有機物，不溶于水，易溶于丙酮等有機溶劑中，所以用丙酮、乙醇等能提取色素。

2．層析液是一種脂溶性很強的有機溶劑。葉綠體色素在層析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，隨層析液在濾紙上擴散得快，溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢。所以用層析法來分離四種色素。（原理：葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇提取色素

各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴散速度不同分離色素）

三、實驗材料：幼嫩、鮮綠的菠菜葉四、實驗步驟：步驟1．提取色素5克綠葉剪碎，放入研缽，加SiO2、CaCO3和5mL丙酮（或10mL無水乙醇）迅速、充分研磨。（若沒有無水乙醇，也可用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇，但要加入適量的無水碳酸鈉，除去水分）注意問題加SiO2加CaCO3加丙酮迅速分析加SiO2為了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨時葉綠素受到破壞。因為葉綠素含鎂，可被細(xì)胞液中的有機酸產(chǎn)生的氫代替，形成去鎂葉綠素，CaCO3可中和液泡破壞釋放的有機酸，防止葉綠體被破壞。葉綠體色素易溶于丙酮等有機溶劑。減少研磨過程葉綠素的分解，減少有毒性的丙酮揮發(fā)。尼龍布起過濾作用。試管口用棉花塞塞緊是為了防止丙酮揮發(fā)。可吸收更多的濾液。層析時，色素分離效果好�？墒箤游鲆和瑫r到達(dá)濾液細(xì)線。2．收集濾液漏斗基部放一單層尼龍布，研磨倒入漏斗內(nèi)擠壓，將濾液收集到小試管中，用棉花塞塞住試管口。3．制備濾紙條將干燥的濾紙，順著紙紋剪成長10cm，寬1cm的紙條，一端剪去二個角，并在距這一端1cm處劃一鉛筆線。4．劃濾液細(xì)線用毛細(xì)吸管吸取少量濾液，沿鉛筆線劃出細(xì)、齊、直的一條濾液細(xì)線，干后重復(fù)三次。5．紙層析法分離色素將3mL層析液倒入燒杯中，將濾紙條（劃線一端朝下）插入層析液中，用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯。6．觀察實驗結(jié)果干燥順著紙紋剪成長條一端剪去二個角濾液細(xì)線越細(xì)、越齊越好。重復(fù)三次。層析液不能沒及濾紙條。燒杯要蓋培養(yǎng)皿蓋。防止色素帶之間部分重疊。增加色素在濾紙上的附著量，實驗結(jié)果更明顯。防止色素溶解在層析液中，層析液中的苯、丙酮、石油醚易揮發(fā)。由上至下分別為：胡蘿卜素（橙黃色）葉黃素（黃色）葉綠素a（藍(lán)綠色）葉綠素b（黃綠色）

擴散最快是胡蘿卜素，擴散最慢是葉綠素b，含量最多的是葉綠素a。四種色素之所以能被分離，是因為四種色素隨層析液在濾紙上的擴散速度不同。

五：實驗討論：

1．濾紙條上的濾液細(xì)線，為什么不能觸及層析液？

答：濾紙條上的濾液細(xì)線如觸及層析液，濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中，實驗就會失敗。2．提取和分離葉綠體色素的關(guān)鍵是什么？

答：提取葉綠體色素的關(guān)鍵是：①葉片要新鮮、濃綠；②研磨要迅速、充分；③濾液收集后，要及時用棉塞將試管口塞緊，以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關(guān)鍵是：一是濾液細(xì)線要細(xì)且直，而且要重復(fù)劃幾次；二是層析液不能沒及濾液線。問題：

（1）二氧化硅的作用？不加二氧化硅對實驗有何影響？

為了使研磨充分。不加二氧化硅，會使濾液和色素帶的顏色變淺。（2）丙酮的作用？它可用什么來替代？用水能替代嗎？

溶解色素。它可用酒精等有機溶劑來代替，但不能用水來代替，因為色素不溶于水。（3）碳酸鈣的作用？不加碳酸鈣對實驗有何影響？

保護色素，防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣，濾液會變成黃綠色或褐色。

（4）研磨為何要迅速？要充分？過濾時為何用布不用濾紙？研磨迅速，是為了防止丙酮大量揮發(fā)；只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中來。色素不能通過濾紙，但能通過尼龍布。（5）濾紙條為何要剪去兩角？防止兩側(cè)層析液擴散過快。

（6）為何不能用鋼筆或圓珠筆畫線？因為鋼筆水或圓珠筆油中含有其它色素，會影響色素的分離結(jié)果。（7）濾液細(xì)線為何要直？為何要重畫幾次？

防止色素帶的重疊；增加色素量，使色素帶的顏色更深一些。（8）濾液細(xì)線為何不能觸到層析液？

防止色素溶解到層析液中。（9）濾紙條上色素為何會分離？

由于不同的色素在層析液中的溶解度不同，因而它們隨層析液在濾紙條上的擴散速度就不同。（10）色素帶最寬的是什么色素？它在層析液中的溶解度比什么色素大一些？最寬的色素帶是葉綠素a，它的溶解度比葉綠素b大一些。

（11）濾紙條上相互間距最大的是哪兩種色素？胡蘿卜素和葉黃素。（12)色素帶最窄的是第幾條色素帶？為何？

第一條色素帶，因為胡蘿卜素在葉綠體的四種色素中含量最少。

實驗十一模擬探究細(xì)胞表面積與體積的關(guān)系（必修一P110）

一．實驗?zāi)康模?/p>

通過探究細(xì)胞大小，即細(xì)胞的表面積與體積，與物質(zhì)運輸效率之間的關(guān)系，探討細(xì)胞不能無限長大的原因。

二．實驗原理：用瓊脂塊模擬細(xì)胞。瓊脂塊越小，其表面積越大，則其與外界效換物質(zhì)的表面積越大，經(jīng)交換進來的物質(zhì)在瓊脂塊中擴散的速度快；瓊脂塊中含有酚酞，與NaOH相遇，呈紫紅色，可顯示物質(zhì)（NaOH）在瓊脂塊中的擴散速度。三．操作步驟：操作方法用塑料餐刀將含酚酞的瓊脂塊切成三塊邊長分別為3cm、2cm、1cm的正方體將3塊瓊脂塊放在燒杯內(nèi)，加入NaOH溶液，將瓊脂塊淹沒，浸泡10min。用塑料勺不時翻動瓊脂塊。戴上手套，用塑料勺將瓊脂塊從NaOH溶液中取出。用紙巾把它們吸干，用塑料刀把瓊脂塊切成兩半。仔細(xì)觀察切面的顏色變化，變成紅色的部分代表NaOH擴散的深度，測量每一塊上NaOH擴散后著色的濃度。記錄測量結(jié)果根據(jù)測量結(jié)果進行計算，并將結(jié)果填在記錄表中注意問題不要用勺子將瓊脂塊切開或挖動其表面應(yīng)避免NaOH與皮膚和眼睛等接觸。如潑灑出來，應(yīng)立即用水沖洗潑灑處。每兩次操作之間必須把刀擦干解釋避免干擾實驗結(jié)果NaOH有腐蝕性避免干擾實驗結(jié)果結(jié)論：瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減��；NaOH擴散的體積與整個瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。四．課后討論題答案：

1.當(dāng)NaOH與含酚酞的瓊脂塊相遇時，其中的酚酞變成紫紅色，這是常用的檢測NaOH的方法，從瓊脂塊的顏色變化就知道NaOH擴散到多遠(yuǎn)；在相同時間內(nèi)，NaOH在每一瓊脂塊內(nèi)擴散的深度基本相同，說明NaOH在每一瓊脂塊內(nèi)擴散的速率是相同的。

2.根據(jù)球體的體積公式V=4/3πr3，表面積公式S=4πr2，計算結(jié)果如下表。細(xì)胞直徑（μm）2030表面積（μm2）12562826體積（μm3）418714130比值（表面積/體積）0.300.203.細(xì)胞越大，物質(zhì)運輸?shù)男�率越低，所以多�?xì)胞生物體是由許多細(xì)胞而不是由少數(shù)體積更大的細(xì)胞構(gòu)成的。細(xì)胞越大，需要與外界環(huán)境交流的物質(zhì)越多；但是細(xì)胞體積越大，其表面積相對越小，細(xì)胞與周圍環(huán)境之間物質(zhì)交流的面積相對小了，所以物質(zhì)運輸?shù)男�率越低�?/p>

實驗十觀察細(xì)胞的有絲分裂（必修一P115）

一．實驗?zāi)康模?/p>

1．制作洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂裝片

2．觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程，識別有絲分裂的不同時期，比較細(xì)胞周期不同時期的時間長短。3．繪制植物細(xì)胞有絲分裂簡圖。二．實驗原理：

1．在高等植物體內(nèi)，有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細(xì)胞。由于各個細(xì)胞的分裂是獨立進行的，因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細(xì)胞。

2．染色體容易被堿性染料（如龍膽紫溶液）著色，通過在高倍顯微鏡下觀察各個時期細(xì)胞內(nèi)染色體（或染色質(zhì)）的存在狀態(tài)，就可判斷這些細(xì)胞處于有絲分裂的哪個時期，進而認(rèn)識有絲分裂的完整過程。三．實驗材料：洋蔥（可用蔥、蒜代替）。因為根尖生長點屬于分生組織，細(xì)胞分裂能力強，易觀察到有絲分裂各個時期的細(xì)胞。四．實驗步驟：步驟一、根尖的培養(yǎng)實驗前3~4天，讓洋蔥放在廣口瓶上，底部接觸清水。根長約5cm時可用。二、裝片的制作（解離→漂洗→染色→制片）1．解離：上午10時至下午2時，剪取洋蔥根尖2~3mm，立即放入盛有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，室溫下解離3~5min。2．漂洗：待根尖酥軟后，用鑷子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗約10min。3．染色：把洋蔥根尖放進盛有質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。注意問題分析置于溫暖處，常換水。因為細(xì)胞分裂和生長需要水分、適宜的溫度和氧氣。解離時間要保證，細(xì)胞才能分散開來。解離時間也不宜過長。漂洗要充分，可換水1~2次。染色時間不宜過長，否則顯微鏡下一片紫色，無法觀察。目的：溶解細(xì)胞間質(zhì)，使組織中的細(xì)胞相互分離開來。此時，細(xì)胞已被鹽酸殺死。否則，根尖過于酥軟，無法取出。目的：洗去解離液，便于染色。龍膽紫等為堿性染料，可使染色體著色。醋酸洋紅溶液也能使染色體著色目的：使細(xì)胞分散，避免細(xì)胞重疊，便于觀察。做得成功的裝片，標(biāo)本被壓成云霧狀。4．制片：用鑷子將這段洋蔥根尖取要弄碎根尖，再垂直出來，放在載玻片上，加一滴清水，向下均勻用力壓片，并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎，蓋上蓋不可移動蓋玻片，玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片。然后，用拇指輕輕地壓載玻片，使細(xì)胞分散開來。三、觀察1．低倍鏡觀察：把裝片放在低倍鏡下，慢慢移動裝片，找到分生區(qū)細(xì)胞。2．高倍鏡觀察：移走低倍鏡，換上高倍鏡，用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰，仔細(xì)觀察，找出處于細(xì)胞分裂期中期的細(xì)胞，再找出前期、后期、末期的細(xì)胞。一定要找到分生區(qū)。在一個視野里，往往不容易找全有絲分裂過程中各個時期的細(xì)胞。如果是這樣，可以慢慢地移動裝片，從鄰近的分生區(qū)細(xì)胞中尋找。分生區(qū)細(xì)胞特點是：細(xì)胞呈正方形，排列緊密，有的細(xì)胞正處于分裂期。討論：1制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么？答：制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵有以下幾點：（1）剪取洋蔥根尖材料時，應(yīng)該在洋蔥根尖細(xì)胞一天之中分裂最活躍的時間；（2）解離時，要將根尖細(xì)胞殺死，細(xì)胞間質(zhì)被溶解，使細(xì)胞容易分離；（3）壓片時，用力的大小要適當(dāng)，要使根尖被壓平，細(xì)胞分散開。

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